測定意義：
哺乳動物血液中的葡萄糖稱為血糖，是其體內(nèi)糖的主要運(yùn)輸形式。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定，調(diào)節(jié)失衡時(shí)出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖；飯后，精神緊張也可出現(xiàn)生理性高血糖。相反，胰島β細(xì)胞增生或腫等，垂體、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退，以及嚴(yán)重肝病患者均可出現(xiàn)低血糖癥狀。此外，饑餓和劇烈運(yùn)動可引起暫時(shí)的低血糖。

測定原理：

葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過氧化氫；過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
基本信息：
產(chǎn)品名稱：血糖含量可見分光光度法檢測試劑盒
測試方法: 可見分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號：GOY-01S6726
分類：糖代謝系列

試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
測定步驟：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個(gè)樣均需做。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個(gè)組分，注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時(shí)間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為檢測結(jié)果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算：
a. 百分率的計(jì)算：
參考如下計(jì)算公式計(jì)算百分率：
百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3，則可以把計(jì)算公式簡化為：
百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計(jì)算出來的百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的百分率偏高，則需適當(dāng)稀釋樣品；如果測定出來的百分率偏低，則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中百分率為50% 時(shí)，反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個(gè)酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。

小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit

人葡萄糖激酶(GCK)ELISA檢測試劑盒Humanglucokinase,GCKELISAKit 96T/48T

大鼠高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)免疫試劑盒 Rat High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA kit

CLIAKitforVEGF-CELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C規(guī)格：48T/96T

免疫細(xì)胞化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測試劑盒(含HRP一抗)10次

ELISAKitFLUA人流感病毒A規(guī)格：48T/96T
小鼠維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒

Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgGELISA試劑盒雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JEIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
RCOR3(Human REST corepressor 3) ELISA Kit 人REST協(xié)阻抑因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-LI-cadherin 肝腸鈣粘連蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh hnRNP F 異質(zhì)核糖核蛋白F抗體 規(guī)格 0.2ml

AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓0脂抗體IgA 96T

PRELP 英文名稱： PRELP蛋白抗體 0.1ml

CDKN2B 英文名稱： 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶劑2B抗體 0.2ml

Anti-LI-cadherin 肝腸鈣粘連蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
血糖含量可見分光光度法檢測試劑盒Anti-TRPM2 /FITC 熒光素標(biāo)記瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CaMK2a(calcium/calmon-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

尿酸鹽子抗體 Anti-UAT 0.1ml

SNAI2 英文名稱： 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 0.1ml

EPHX2 英文名稱： 胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ILK-1(Thr173) 0酸化整合素連接激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

CaMK2a(calcium/calmon-dependent protein kinase II alpha) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg