測定步驟：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個(gè)樣均需做。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

基本信息：
產(chǎn)品名稱：蘋果酸合酶（MS）微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號：GOY-01S6599
分類：乙醛酸循環(huán)系列
測定意義：
蘋果酸合酶（MS，EC 4.1.3.2）是屬于轉(zhuǎn)移酶中?；D(zhuǎn)移酶的一類，主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，在MS催化下乙醛酸與乙酰輔酶A反應(yīng)生成蘋果酸。

測定原理：

MS催化乙酰CoA和乙醛酸產(chǎn)生蘋果酸，同時(shí)生成輔酶A，輔酶A使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品：

酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水

操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個(gè)組分，注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時(shí)間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為保證檢測結(jié)果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算：
a. 抑制百分率的計(jì)算：
參考如下計(jì)算公式計(jì)算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3，則可以把計(jì)算公式簡化為：
抑制百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計(jì)算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適當(dāng)稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時(shí)，反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個(gè)酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。

小鼠Sesin小鼠3蛋白(SESN3)ELISA試劑盒 ，英文名： SESN3 ELISA Kit

人凝血酶受體()ELISA檢測試劑盒Humahrombieceptor,ELISAKit 96T/48T

大鼠花生四烯酸(AA)免疫試劑盒 Rat Arachidonic Acid,AA ELISA Kit

英文名稱RatSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit大鼠5-羥色氨(5-HT)規(guī)格：96T/48T

裂解液Ⅹ真菌/酵母細(xì)胞活性化蛋白制備

ELISAKitMAdCAM-1人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子規(guī)格：48T/96T
小鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human ai histone aibody of ai -DNA (H2A-H2B) / two mer -DNA aibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒

Humanepithelialspecificaigen,ESAELISAKit 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor8-iso-PG(Human8-isoprostaglandin)ELISAKit人8異前列腺素規(guī)格：48T/96T

異丁甲基細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測試劑盒20次

MouseMotilin,MTLELISAKit小鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit 人單皰疹病毒抗原2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MAP1LC3A 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KCTD12 離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml

ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgM 96T

PBLD 英文名稱： MAWD結(jié)合蛋白抗體 0.2ml

Cell adhesion molecule 4 英文名稱： 細(xì)胞粘附分子4抗體 0.1ml

Anti-MAP1LC3A 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
蘋果酸合酶（MS）微量法檢測試劑盒Anti-STAT2/FITC 熒光素標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受體α-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

顆粒蛋白前體抗體 Anti-PGRN 0.1ml

14-3-3 beta 英文名稱： 14-3-3β抗體 0.1ml

EGFR 英文名稱： 表皮生長因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MyoD1(Ser200) 0酸化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受體α-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。