

上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
亮氨酸氨基肽酶(LAP)微量法檢測試劑盒
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訂貨量(盒)
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≥1
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測定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
基本信息:
產(chǎn)品名稱:亮氨酸氨基肽酶(LAP)微量法檢測試劑盒
測試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號:GOY-01S6514
分類:氨基酸代謝系列
測定意義:
LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細(xì)胞損傷,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的檢測能從不同側(cè)面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展。
測定原理:
LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計(jì)算LAP活性。
自備用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定:
a. 參考下表使用96孔板加入各個組分,注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意:加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始,可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明:孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異,但為保證檢測結(jié)果的一致性,推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片,可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算:
a. 抑制百分率的計(jì)算:
參考如下計(jì)算公式計(jì)算抑制百分率:
抑制百分率=[(A空白對照1-A空白對照2)-(A樣品-A空白對照3)] / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3,則可以把計(jì)算公式簡化為:
抑制百分率=(A空白對照1-A樣品) / (A空白對照1-A空白對照2) × 100%
如果計(jì)算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ,則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的抑制百分率偏高,則需適當(dāng)稀釋樣品;如果測定出來的抑制百分率偏低,則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義:在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時,反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位 (unit)。注意:SOD的活力單位的定義方式有很多種,不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。
小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-3 ELISA Kit
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
人T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒 Human HTLV-Ⅰ/II aibody ELISA kit
英文名稱MouseNeuroophin-3,-3ELISAkit小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(-3)規(guī)格:96T/48T
TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測試劑盒(含HRP一抗)10次
RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA試劑盒兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human sarcomeric - actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒
Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforApoA1(Humanai-apolipoproteinA1aibody)ELISAKit人抗載脂蛋白抗體A1規(guī)格:48T/96T
血清/血漿總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fas-L human 人凋亡相關(guān)因子配體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti- Glu-Glu tag抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NOX5 還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸抗體 規(guī)格 0.2ml
AChRab-M1(Mouse acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 小鼠乙酰膽堿受體-M1抗體 96T
TP53I11 英文名稱: 蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體 0.2ml
C6orf203 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框203抗體 0.2ml
Anti- Glu-Glu tag抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
亮氨酸氨基肽酶(LAP)微量法檢測試劑盒Anti-STAT5/FITC 熒光素標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白激酶C抗體 Anti-PKC 0.1ml
S6PDH 英文名稱: 6-0酸山梨醇脫氫酶抗體 0.2ml
E1 Ubiquitin Activating Enzyme 英文名稱: 泛素激活酶E1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-mTOR (Tyr) 0酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

