測定步驟：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個(gè)樣均需做。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

基本信息：
產(chǎn)品名稱：肌酸激酶(CK)紫外分光光度法檢測試劑盒
測試方法: 紫外分光光度法
規(guī)格 : 50管/48樣
貨號：GOY-01S6364
分類：輔酶Ⅱ系列
測定意義：
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中，能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷酰基反應(yīng)，在能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮和ATP再生中有重要作用，是臨床診斷心腦疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。

測定原理：

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP，己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿和蒸餾水。

操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
3. 樣品測定：
a. 參考下表使用96孔板加入各個(gè)組分，注意設(shè)置樣品孔和各種空白對照孔。
注意：加入反應(yīng)啟動工作液后反應(yīng)即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動工作液的時(shí)間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說明：孵育25至35分鐘檢測出來的SOD活力無顯著差異，但為保證檢測結(jié)果的一致性，推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長作為參考波長進(jìn)行雙波長測定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算：
a. 抑制百分率的計(jì)算：
參考如下計(jì)算公式計(jì)算抑制百分率：
抑制百分率＝[(A空白對照1－A空白對照2)－(A樣品－A空白對照3)] / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果沒有設(shè)置空白對照3，則可以把計(jì)算公式簡化為：
抑制百分率＝(A空白對照1－A樣品) / (A空白對照1－A空白對照2) × 100%
如果計(jì)算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要把該樣品重新測定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適當(dāng)稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測樣品。
b. SOD酶活力單位的定義：在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時(shí)，反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個(gè)酶活力單位 (unit)。注意：SOD的活力單位的定義方式有很多種，不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。

小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-β/IFNB ELISA Kit

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA檢測試劑盒Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 96T/48T

人P0蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒 Human myelin protein zero aibody IgM ELISA Kit

英文名稱MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)規(guī)格：96T/48T

胞漿谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA試劑盒兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒

Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T

血液腎素(renin)熒光定量檢測試劑盒20次

MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HBxAg(Human hepatitis B virus X Ag) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-IRS1(Ser636/639) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長) 規(guī)格 0.1ml

17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮 96T

phosphos-PCNA (Tyr211) 英文名稱： 0酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體 0.1ml

CPEB3 英文名稱： 細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Ser636/639) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
肌酸激酶(CK)紫外分光光度法檢測試劑盒Anti-TGM3/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化復(fù)制因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

肺表面活性蛋白B抗體 Anti-SP-B 0.1ml

SCN8A 英文名稱： 通道蛋白8α抗體 0.1ml

Anei-ENPP2 英文名稱： 自分泌運(yùn)動因子抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser629) 0酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化復(fù)制因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。