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主營(yíng)產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢(xún), 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開(kāi)發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(xún)(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營(yíng)), 化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測(cè)量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類(lèi)醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷(xiāo)售.
胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法檢測(cè)試劑盒
價(jià)格
訂貨量(盒)
¥500.00
≥1
店鋪主推品 熱銷(xiāo)潛力款
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測(cè)定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
基本信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法檢測(cè)試劑盒
測(cè)試方法: 微量法
規(guī)格 : 100管/96樣
貨號(hào):GOY-01S6355
分類(lèi):輔酶Ⅱ系列
測(cè)定意義:
ICDHc(EC
測(cè)定原理:
利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測(cè)定NADPH濃度的增加。
所需的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:產(chǎn)品僅用于科研
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
3. 樣品測(cè)定:
a. 參考下表使用96孔板加入各個(gè)組分,注意設(shè)置樣品孔和各種空白對(duì)照孔。
注意:加入反應(yīng)啟動(dòng)工作液后反應(yīng)即會(huì)開(kāi)始,可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應(yīng)啟動(dòng)工作液的時(shí)間先后差異而導(dǎo)致的誤差。
b. 37℃孵育30分鐘。
說(shuō)明:孵育25至35分鐘檢測(cè)出來(lái)的SOD活力無(wú)顯著差異,但為保證檢測(cè)結(jié)果的一致性,推薦孵育30分鐘。
c. 450nm 測(cè)定吸光度。如無(wú)450nm 濾光片,可以使用420-480nm 的濾光片。也可以使用大于600nm 的波長(zhǎng)作為參考波長(zhǎng)進(jìn)行雙波長(zhǎng)測(cè)定。
4. 樣品中總SOD活力的計(jì)算:
a. 抑制百分率的計(jì)算:
參考如下計(jì)算公式計(jì)算抑制百分率:
抑制百分率=[(A空白對(duì)照1-A空白對(duì)照2)-(A樣品-A空白對(duì)照3)] / (A空白對(duì)照1-A空白對(duì)照2) × 100%
如果沒(méi)有設(shè)置空白對(duì)照3,則可以把計(jì)算公式簡(jiǎn)化為:
抑制百分率=(A空白對(duì)照1-A樣品) / (A空白對(duì)照1-A空白對(duì)照2) × 100%
如果計(jì)算出來(lái)的抑制百分率小于30% 或大于70% ,則通常需要把該樣品重新測(cè)定。盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內(nèi)。如果測(cè)定出來(lái)的抑制百分率偏高,則需適當(dāng)稀釋樣品;如果測(cè)定出來(lái)的抑制百分率偏低,則需重新準(zhǔn)備濃度較高的待測(cè)樣品。
b. SOD酶活力單位的定義:在上述化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為50% 時(shí),反應(yīng)體系中的SOD酶活力定義為一個(gè)酶活力單位 (unit)。注意:SOD的活力單位的定義方式有很多種,不同的活力單位需根據(jù)其定義的不同進(jìn)行適當(dāng)換算。
小鼠β防御素2(β-BD-2)ELISA試劑盒 ,英文名: β-BD-2 ELISA Kit
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
英文名稱(chēng)MouseHRAbIgGELISAKit小鼠抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格:96T/48T
胞內(nèi)結(jié)構(gòu)免疫化學(xué)固著溶液10毫升
rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA試劑盒兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞分裂素(Cytokinin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒
Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2規(guī)格:48T/96T
血液維生素A含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
M-AChR M3(Human muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Rhesus antibody Rh lamin A/C 核纖層蛋白A/C抗體 規(guī)格 0.2ml
16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1) ELISA Kit 人16α羥基雌酮1 96T
PROSAAS 英文名稱(chēng): 枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶1抑制劑抗體 0.2ml
CYBR1 英文名稱(chēng): 細(xì)胞色素B還原酶1抗體 0.2ml
Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)微量法檢測(cè)試劑盒Anti-TM/FITC 熒光素標(biāo)記血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OPN 骨橋蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體1抗體 Anti-TGF-βR1/ALK 0.1ml
SKP1 英文名稱(chēng): S期激酶相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
alpha Elastin 英文名稱(chēng): α彈性蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LAT (Tyr191) 0酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
OPN 骨橋蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。