Thermo ND 2000微量分光光度計

NanoDrop 2000超微量紫外\可見分光光度計是NanoDrop的新產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要0.5~2ul，在檢測臺上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點。此產(chǎn)品設(shè)計受保護，并在全世界廣受歡迎，其準確度與便利性讓科學(xué)家得以更進行各項研究。

NanoDrop 2000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp）可提供190~840nm的全光譜檢測，且不需要暖機，開機后立即使用。搭配高感度CCD array檢測器，檢測吸收值可高達300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。

      待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop 2000的高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortex mixer震勻為虛好，若無vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔心genomic DNA可能因前述動作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保2ul具有代表性。

     檢測時選擇不同檢測模式，可以得到快速的結(jié)果：

Nucleic Acid –吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。

UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。

A280蛋白質(zhì)定量法– 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計算。

BCA、Bradford及Lowry –依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標準曲線并計算R square，待測蛋白質(zhì)濃度。

 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請詳閱試劑說明書并制備不同濃度的標準品，在快時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標準曲線。每個標準曲線多可有七個標準品，每個標準品多可做五重復(fù)。

 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes低塵擦拭紙（編號：34155）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。

Thermo ND 2000微量分光光度計濃度范圍：

樣品種類	低濃度	高濃度 （超過時請稀釋樣品）	再現(xiàn)性（五重復(fù)以上）
核酸	2 ng/ul	15000 ng/ul （dsDNA） 12000 ng/ul （RNA）	濃度范圍在 2-100 ng/ul 時，SD為 ± 2 ng/ul 濃度范圍大于 100 ng/ul 時，CV為 ± 2%
純BSA	0.10 mg/ml	100 mg/ml	濃度范圍在0.05-10 mg/ml時，SD為± 0.10 mg/ml 濃度大于10 mg/ml時，CV為± 2%
蛋白質(zhì)，以BCA方式定量	0.2 mg/ml	8.0 mg/ml	CV：± 2% （在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然）
蛋白質(zhì)，以modified Lowry方式定量	0.2 mg/ml	4.0 mg/ml	CV：± 2%（在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然）
蛋白質(zhì)，以Bradford方式定量	100 ug/ml	8000 ug/ml	濃度范圍在 100-500 ug/ml 時，SD為 ± 25 ug/ml 濃度大于 500 ug/ml 時，CV為 ± 5%
蛋白質(zhì)，以Mini Bradford方式定量	15 ug/ml	100 ug/ml	濃度范圍在15-50 ug/ml時，SD為± 4 ug/ml 濃度大于50 ug/ml時，CV為± 5%