鴨瘟病毒(DPV)檢測試劑盒(熒光PCR法)的拷貝的拷貝的拷貝的拷貝
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用途 科研
產(chǎn)品規(guī)格 50T
品牌 XYbio
貨號 PD-0611
產(chǎn)地 國產(chǎn)
純度 100%
是否進口
商品介紹
基本信息
用途:科研
產(chǎn)品規(guī)格:50T
品牌:XYbio
貨號:PD-0611
產(chǎn)地:國產(chǎn)
純度:100%
是否進口:

鴨瘟病毒(DPV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:鴨瘟病毒(DPV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測樣本中的鴨瘟病毒(DPV),用于鴨瘟病毒(DPV)感染的輔助診斷。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計一對鴨瘟病毒(DPV)特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對雞馬立克病毒(MDV)的核酸進行體外擴增檢測,用于對可疑感染者的病原學(xué)檢測。

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【核酸提取】

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取,請按照試劑說明書進行操作。


1.    試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,多配制 1 份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:


將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21μL/管。


2.    加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻, 短暫離心。


3.    PCR 擴增(核酸擴增區(qū))

3.1  將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

3.2  設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇

ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

3.3  推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:


4.    結(jié)果分析判定

4.1  結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

4.2  結(jié)果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;

可疑:檢測通道 35值≤38,建議重復(fù)檢測,如果檢測通道仍為 35值≤38,且曲線有明顯的增長曲線, 判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。


5.    質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示;

陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,否則實驗視為無效。


6.    檢測方法的局限性

6.1 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);

6.2 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

6.3 陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

6.4 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

6.5 不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

6.6 試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;

6.7  本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。


【注意事項】

1.    所有操作嚴(yán)格按照說明書進行;

2.    試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完全混勻并短暫離心;

3.    反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.    反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.    使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.    樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;

7.    實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.    試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理。

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱:上海烜雅生物科技有限公司


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