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豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒
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豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒的原理:
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA試劑盒在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體。
ELISA試劑盒樣本收集以及處理方法:
液體類(lèi)標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
A、檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。
B、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。*計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
【生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則】
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
【試劑盒特點(diǎn)】
A. 分子量大。合成肽采用化學(xué)方法制備,由于工藝的局限,合成數(shù)量有限,只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸;而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
B. 穩(wěn)定性好。人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到保證,早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只3-4個(gè)月,采用基因工程抗原后效期大大延長(zhǎng)了。
C. 基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。
D. 純化難度大?;蚬こ炭乖募兓夹g(shù)難度較大。
合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特點(diǎn): a.分子量太小;b.一般只含有一個(gè)抗原決定簇;c.純度高;d.穩(wěn)定性差。
購(gòu)買(mǎi)豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題:
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Xuanya烜雅有明確的價(jià)格體系,具體的價(jià)格可咨詢(xún)我們的工作人員。
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4、Xuanya烜雅售后服務(wù)?
(1)如是產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,我們將免費(fèi)為您替換試劑盒。
(2)如實(shí)驗(yàn)者未按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致的問(wèn)題,我司將不負(fù)有責(zé)任。
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(1)常用指標(biāo)在客戶(hù)下單后即可發(fā)貨。
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豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒新產(chǎn)品:
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D3 ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D2 ELISA試劑盒
小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒 Mouse estrogen,E ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D1 ELISA試劑盒
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA試劑盒
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA試劑盒
小鼠酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA試劑盒
小鼠特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Mouse prostate specific antigen,PSA ELISA試劑盒
小鼠標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒 Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA試劑盒
小鼠標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 Mouse mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA試劑盒
小鼠胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 Mouse heme oxygenase 1,HO-1 ELISA試劑盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA試劑盒
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA試劑盒