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牛鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA檢測試劑盒
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牛鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA檢測試劑盒實驗原理:
試劑盒采用夾心酶免法,采用了兩種高特異性抗體,TMB作為著色劑,最終溶液所顯示的顏色強度與樣品中指標的量成正比
檢測范圍:參考說明書
使用前,所有樣品應平衡至室溫,大約30min,然后充分混勻,確保試劑質量無變化,標準曲線和樣品檢測同時進行
試劑 | 檢測樣品 | 標準品 | 檢測樣品對照孔 | 試劑對照孔 |
檢測樣品100ul | 稀釋標準品(1-7管)100ul | EIA緩沖液(第8管) 100ul | EIA緩沖液100ul | |
蓋板,37℃下孵育60min | ||||
洗板7次 | ||||
酶標抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
蓋板,4℃下孵育30min | ||||
洗板9次 | ||||
顯色劑 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室溫避光溫育30min | ||||
終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加終止液后30min內450nm處讀取OD值 |
牛鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
牛鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA檢測試劑盒自備物品:
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
牛鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA檢測試劑盒特別注意:
1. 樣品采集后應立即檢測,如需貯存的,則應放置在冰凍條件下,避免反復凍融,檢測前應在低溫下將其溶解并完全混合
2. 如有需要,樣品可用EIA緩沖液稀釋
3. 建議試驗樣品和標準品做雙份檢測
4. 試驗樣品應在中性PH范圍內,有機溶劑的污染會影響試驗
5. 只能使用試劑盒內提供的洗滌液洗板,洗板不充足可能會導致試驗失敗
6. 徹底倒去洗滌液,吸水紙上拍干,不能用吸水紙擦拭微孔
7. 底物液應避光保存,因其對光敏感,且要避免接觸金屬
8. 加入終止液后30min內讀數
本產品僅用于科研,不能用于臨床
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