睿信生物-山羊Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術支持。公司干技術人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設備,并與知名高校、研究機構、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
山羊Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa試劑盒
為了構建山羊CD36基因的組織表達譜及揭示基因表達與肌內(nèi)脂肪(IMF)沉積的關系,試驗采用熒光定量PCR(qPCR)技術檢測CD36基因在山羊不同器官組織和三個發(fā)育階段的不同肌肉組織表達情況,并將基因mRNA表達量與IMF含量進行相關分析。結(jié)果表明:CD36基因在山羊心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、脂肪和背最長肌等器官組織中均有表達,其中在脂肪組織中表達量,在脾臟中次之,而在心臟中表達量。CD36基因在1—3月齡、8—10月齡時表達變化趨勢相同,在背最長肌、股二頭肌和臂三頭肌中呈逐漸上升趨勢,而24月齡時則呈相反變化趨勢。相關性分析表明,肌肉組織中CD36基因mRNA表達量與IMF含量呈正相關,且在臂三頭肌中相關性達到顯著水平(P〈0.05)。說明CD36基因可以作為山羊IMF沉積的候選基因。分離純化了牛小腦1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)受體,并將其重建到脂質(zhì)體中,無論4℃還是25℃Ca2+對未重建的IP3受體結(jié)合IP3活性都沒有影響;而Ca2+對重建的IP3受體的影響則與溫度有關.4℃時脂蛋白體外側(cè)Ca2+([Ca2+].)不影響IP3受體與IP3結(jié)合,而25℃時[Ca2+].從0上升到100 nmol/L時IP3結(jié)合活力逐步增加,但[Ca2+].繼續(xù)增加會使IP3結(jié)合迅速下降,并最終導致完全被.構象測定表明,在4℃時,[Ca2+].并不影響重建IP3受體的整體構象,在25℃時,10μmol/L的[Ca2+].對重建IP3受體的整體構象、膜結(jié)構域和胞質(zhì)結(jié)構域構象的影響顯著不同于100 nmol/L的[Ca2+].
山羊牛皮蠅感染是由塞列努斯普杰瓦利斯基蠅(P.silenus)幼蟲引起的蠅蛆病。該病依據(jù)從動物背部、脅部皮膚檢出牛皮蠅而定性。最近,D.Otranto等將美國牛皮蠅的ELISA試劑盒用于P.silenus,并對其效果作了評價。首先用ELISA驗證了美國牛皮蠅抗原與P.Silenus抗血清,克隆了中華蜜蜂DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶3(Dnmt3)基因(GenBank登錄號為JQ740768);采用熒光定量PCR檢測不同發(fā)育時期工蜂(4日齡蛹,1,7和30日齡成年蜂及產(chǎn)卵工蜂)和蜂王(4日齡蛹,1日齡蜂王和產(chǎn)卵蜂王)頭部的Dnmt3基因mRNA的表達量。結(jié)果表明:該基因cDNA序列全長2277bp,編碼758個氨基酸殘基,預測的蛋白分子量為88.24kD,等電點為7.85。將中華蜜蜂與其他物種的Dnmt3基因的結(jié)構域進行比對,同時將該基因推導的氨基酸序列與其他物種的Dnmt3氨基酸序列進行同源性比對和系統(tǒng)發(fā)育分析,發(fā)現(xiàn)與西方蜜蜂的Dnmt3序列一致性高達99%。該基因在工蜂和蜂王不同發(fā)育時期均有表達,1日齡工蜂與7日齡工蜂中沒有顯著差異(P>0.05),30日齡工蜂中的表達量顯著高于前兩者(P<0.05);蜂王蛹中的表達量顯著高于工蜂蛹(P<0.05);1日齡的蜂王中的表達量顯著高于1日齡的工蜂(P<0.05);產(chǎn)卵工蜂與產(chǎn)卵蜂王中的表達量沒有差異(P>0.05)。這種表達情況提示其可能與工蜂勞動分工及蜜蜂卵巢發(fā)育有關。