口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒
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口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒

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用途范圍 科研
產(chǎn)地 國產(chǎn)/進(jìn)口
品牌 xuanya
規(guī)格 50T
貨號 XY-SD-R-1048
是否進(jìn)口
商品介紹
基本信息
用途范圍:科研
產(chǎn)地:國產(chǎn)/進(jìn)口
品牌:xuanya
規(guī)格:50T
貨號:XY-SD-R-1048
是否進(jìn)口:


【產(chǎn)品名稱】

商品名稱:口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒

Name :Foot-and-mouth Disease Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預(yù)期用途】

口蹄疫病毒(FMDV)屬小 RNA 病毒科屬,是最小的動(dòng)物病毒之一,在丐界范圍廣泛分布,其中,O、A、C 型 FMDV 的毒力和抗原性均易發(fā)生變易,幾乎遍布亞、非、拉、歐各洲;AsiaⅠ型主要分布在亞洲;SATI、SAT2、SAT3 型主要分布在非洲[1-2]??谔阋卟《狙逍蛷?fù)雜多變,為檢測帶來了較大的難度[3]。

本試劑盒適用于檢測口蹄疫易感動(dòng)物的水泡皮及水泡液、O/P 液等標(biāo)本中口蹄疫病毒通用型 RNA,適用于口蹄疫病毒通用型感染的輔助診斷。

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒對口蹄疫病毒通用型特異核酸序列設(shè)計(jì)引物和探針,用一步法熒光RT-PCR 技術(shù)對口-蹄疫病毒通用型 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨-床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

名 稱

規(guī) 格

酶液

50μL×1 管

FMDV-U 反應(yīng)液

1.0mL×1 管

FMDV-U 陽性質(zhì)控品

50μL ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μL ×1 管

注:

1) 不同批號試劑不能混用。

2) 試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測次數(shù)。

口-蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

水泡皮樣品:稱取水泡皮 0.5g 于研磨器中研磨,加入生理鹽水繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;OP 液或水泡液樣品,直接取 100μL 置于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2 RNA 提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的RNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑

FMDV-U 反應(yīng)液

酶液

用量

20μL

1μL

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21uL/管。

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時(shí)間

收集熒光信號

1

1 cycle

42℃

20min

2

1 cycle

95℃

10min

3

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

5. 結(jié)果分析判定

5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

5.2 結(jié)果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且明顯的擴(kuò)增曲線。

可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)明顯曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果如果同樣出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線則為陽性,否則為陰性。

陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。

6. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線且無 Ct 值顯示;

陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。


口-蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標(biāo)本采集】

病死或撲殺動(dòng)物,取水泡皮及水泡液;待檢活動(dòng)物,取 O/P 液 2~3mL。

口-蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

產(chǎn)品圖片:

口-蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱:上海烜雅生物科技有限公司

生產(chǎn)地址:金海公路3265號14幢11546室


上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的口-蹄疫病毒通用型(FMDV-U)熒光PCR檢測試劑盒質(zhì)量高,價(jià)格低,售后有保證。為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。


本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷。


請直接向我司客服索取說明書


本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷。


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公司名稱 上海烜雅生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 黃經(jīng)理 (QQ:1517347860)
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