【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒

Name ：Yersinia Pestis Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【預(yù)期用途】

鼠疫是由鼠疫耶爾森氏菌（Yersinia Pestis, YP）,簡(jiǎn)稱(chēng)鼠疫桿菌，引起危害人類(lèi)健康的烈性傳染病之一，具有傳染性強(qiáng)、傳播迅速、疫情嚴(yán)重、死亡率高等特點(diǎn)， 為國(guó)際檢疫傳染病[1]。

本試劑盒適用于檢測(cè)動(dòng)物腺、肝、脾、肺組織及人痰、血液等標(biāo)本中分離出的鼠疫桿菌，用于鼠疫桿菌的輔助診斷。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采對(duì)鼠疫桿菌基因設(shè)計(jì)特異性的引物和探針，用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)鼠疫桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【試劑組成】

名 稱(chēng)	規(guī) 格
酶液	50μL×1 管
YP 反應(yīng)液	1.0mL×1 管
YP 陽(yáng)性質(zhì)控品	50μL×1 管
陰性質(zhì)控品	250μL×1 管

說(shuō)明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次，有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【標(biāo)本采集】

患病動(dòng)物：腺、肝、脾、肺組織、糞便、血液人：痰；尿液、血液

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò) 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1 樣本前處理

組織樣品：稱(chēng)取組織樣品約 0.5g，置于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，勻漿后取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；

痰、尿液等液體樣品：取 100μL 于滅菌離心管中；

血液樣品：取抗凝血下層血細(xì)胞 50μL，加入 100μL 雙蒸水吹勻。

1.2 DNA 提取

1) 對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒溫處理 10min，13,000

rpm 離心 5min，取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2) DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA 提取試劑盒

（離心柱提取法），請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照；樣品每滿(mǎn) 7 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑	YP 反應(yīng)液	酶液
用量（樣本數(shù)為 N）	20μL	1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，21uL/管。

3. 加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4. PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；

熒光通道選擇： 檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）

NONE，請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟	循環(huán)數(shù)	溫度	時(shí)間	收集熒光信號(hào)
1	1 cycle	95℃	10min	否
2	40 cycles	94℃	15sec	否
		55℃	30sec	是

7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無(wú)明顯擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

產(chǎn)品圖片：

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【注意事項(xiàng)】

【參考文獻(xiàn)】

[1] 國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.SN/T 1280-2003 國(guó)境口岸鼠疫檢驗(yàn)規(guī)程[S].北京:科學(xué)出版社, 2003.

[2] 張志凱, 海榮, 蔡虹, 等. 鼠疫耶爾森菌的多重 PCR 檢測(cè)方法[J]. 中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志, 2007.

[3] 吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. DB22/T 2081-2014 鼠疫耶爾森菌核酸的測(cè)定-熒光PCR 方法[S].

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱(chēng)：上海烜雅生物科技有限公司

生產(chǎn)地址：金海公路3265號(hào)14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)質(zhì)量高，價(jià)格低，售后有保證。為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。

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本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷。

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品：

禽病    XY-PD-D-1001    雞滑液囊支原體(MS)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-D-1002    雞馬立克病毒(MDV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-D-1003    雞毒支原體(MG)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-D-1004    鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-D-1005 腸炎沙門(mén)氏菌（SE）核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-D-1006    禽腺病毒(FADV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

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禽病    XY-PD-R-1008    新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-R-1009    禽白血病病毒J型(ALV-J)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

禽病    XY-PD-R-1010    禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

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