睿信生物-小鼠備解素P因子補體-Pfc-ELISA試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
店齡6年 企業(yè)認證
聯(lián)系人
林經理 經理
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經營模式
生產廠家
所在地區(qū)
福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質產品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術支持。公司干技術人員均有10年以上的從業(yè)經驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產設備,并與知名高校、研究機構、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質的產品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
小鼠備解素P因子補體 Pfc ELISA試劑盒
目的為從天然化合物中篩選具有體液免疫抑制活性的先導化合物,本研究將構建高靈敏且價格低廉的小鼠免疫球蛋白IgG的ELISA檢測方法。方法利用山羊抗小鼠IgG的Fc段抗體、生物素標記的山羊抗小鼠IgG的F(ab’)2段抗體、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素構建小鼠免疫球蛋白IgG的ELISA檢測方法;通過對包被抗體濃度、檢測抗體濃度和鏈霉親和素濃度的優(yōu)化,使檢測方法靈敏度達到;再利用該檢測方法檢測體外培養(yǎng)小鼠B細胞上清中IgG濃度驗證方法的有效性。結果在山羊抗小鼠IgG的Fc段抗體濃度達到5μg·mL~(-1),生物素標記的山羊抗小鼠IgG的F(ab’)2段抗體濃度達到0.25μg·mL~(-1),辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素濃度達到0.5μg·mL~(-1),小鼠免疫球蛋白IgG的ELISA檢測方法靈敏度達到(0.05ng·mL~(-1)),線性范圍在0.1~10ng·mL~(-1);該檢測方法可以高靈敏檢測體外培養(yǎng)LPS刺激小鼠B細胞分泌的IgG抗體。結論本研究成功構建高靈敏且價格低廉的小鼠免疫球蛋白IgG的ELISA檢測方法。