艱難梭菌熒光PCR檢測試劑盒(TCD-A)
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用途范圍 科研
產(chǎn)地 美國/中國
品牌 xuanya
規(guī)格 50T
貨號 XY-DT-D-1329
商品介紹

【中文名稱】艱難梭菌熒光PCR檢測試劑盒(TCD-A)

【英文名稱】Clostridium difficile (TCD-A) nucleic acid detection kit (PCR method)

【產(chǎn)品及特點】

艱難梭菌熒光PCR檢測試劑盒(TCD-A)是基于熒光染料檢測的即用型 PCR 試劑盒,可以對靶片段進行實時定量PCR 分析(quantitative PCR、qPCR)。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料 DNAgreen 等所有實時定量 PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行實時定量 PCR 反應(yīng)和 HRM 分析,具有廣泛的用途。

1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行實時定量 PCR 實驗和 HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于 SYBR Green I  LC Green 染料的 qPCR mix 則不能同時用于上述兩種實驗。

2. 使用第三代飽和型熒光染料,信號強,不會抑制 PCR 反應(yīng)。

3. 快捷,即用型的預(yù)配液使加樣操作步驟大大簡化,避免了交叉污染,降低實驗誤差。

4. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能檢測到濃度為 50 拷貝/mL 的靶分子。


艱難梭菌熒光PCR檢測試劑盒(TCD-A)【規(guī)格及成分】

             成分

100次熱封袋包裝

qPCR MagicMix,2×

1 mL

專一性引物對

200 μL

陽性對照

50 μL

超純水

1 mL

使用手冊

1 份

艱難梭菌熒光PCR檢測試劑盒(TCD-A)【運輸及保存】

低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。

【產(chǎn)品圖片】

 

【自備試劑】

DNA 模板、引物、超純水。

【使用方法】

1. 以 20 uL 的 qPCR 反應(yīng)體系為例:在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:

反應(yīng)體系成分

20 uL 體系

終濃度

qPCR MagicMix,2×

10 uL

自備引物一 a

x uL

0.1-0.5 uM

自備引物二 a

x uL

0.1-0.5 uM

自備模板 a

x uL


自備 ROXb

2 uL

(可以不加)

補超純水到

20 uL


放入熒光 PCR 儀中進行擴增, 并在退火或延長步驟中記錄熒光信號。

注意:

a) 通常引物濃度以 0.2 μM 可得到較好結(jié)果,可以終濃度 0.1-1.0 μM 作為設(shè)定范圍的參考;通常 DNA模板的量以10-100 ng基因組 DNA或1-10 ng cDNA為參照,因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數(shù)不同,可對模板進行梯度稀釋,以確定*的模板使用量。

b) ROX 校正染料:如果使用 ABI 公司的 7500,7700 和 7900 三種型號的熒光 PCR 儀器,則需用自備的 ROX 進行 Ct 值校正。對 ABI 7700 和 7900,ROX 的*濃度為 1×(即在每 20 uL 反應(yīng)體系中加 2 uL 10×ROX)。對ABI 7500, ROX 的*濃度為 0.05-0.1×(每 20 uL 反應(yīng)體系加 0.1-0.2uL 10×ROX;也可將 10×ROX 稀釋到 1×,然后每個反應(yīng)體系加入 1-2 uL1×ROX)。ROX 會在溶解曲線中產(chǎn)生噪音,因此,如果出現(xiàn)了雜峰,將軟件“Passive Reference Dye”中的“ROX”選項取消打勾,然后重新分析數(shù)據(jù)。

對于 iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000, RotorGene3000,RotorGene 6000 和 LightCycler 480 等型號的熒光PCR 儀器,ROX 不是必須的,但加入的話也不會影響整個 PCR 分析。

2. 循環(huán)步驟:根據(jù)擴增子的性質(zhì)和儀器性能,從以下三個過程中任選一個進行擴增。

 

A:兩步快速循環(huán)法:適用于引物 Tm 值設(shè)計為 60℃的反應(yīng)

酶活化

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

酶活化

95℃

10 min

1

變性

退火&延伸

95℃

60℃

15 s

1 min

35-40

注意:本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預(yù)變性 95℃、10 min 條件下實現(xiàn)酶的活化。

退火溫度請以 60-64℃作為設(shè)定范圍的參考,發(fā)生非特異性反應(yīng)時,可提高退火溫度。

 

B:三步快速循環(huán)法:適用于延伸步驟溫度高于退火步驟的 PCR(長引物 PCR)

  • 循環(huán)步驟

    溫度

    時間

    循環(huán)數(shù)

    酶活化

    95℃

    10 min

    1

    變性

    退火

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    公司名稱 上海烜雅生物科技有限公司
    聯(lián)系賣家 黃經(jīng)理 (QQ:1517347860)
    電話 재잭잵-잰잵잵잰잵잯잯잳
    手機 잵잲잳재잵잱잱잮잭잵잱
    網(wǎng)址 http://www.xuanyabio.com
    地址 上海市奉賢區(qū)
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