睿信生物-大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體-RAGE-elisa試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領(lǐng)域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備,并與知名高校、研究機構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設(shè),我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 RAGE elisa試劑盒
目的觀察年齡因素對骨髓間充質(zhì)干細胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)成骨分化能力的影響;了解基因?qū)夏甏笫驧SCs成骨分化能力的影響。方法1月齡(幼年組)、9月齡(成年組)及24月齡(老年組)雄性Wistar大鼠各6只,取MSCs經(jīng)體外分離、培養(yǎng)及攜帶骨形成蛋白2(bonemorphogeneticprotein2,BMP-2)基因的腺病毒載體(Ad-BMP-2)轉(zhuǎn)染后,定量檢測BMP-2、堿性磷酸酶(alkalinephosphate,ALP)表達,以及成骨細胞標志性蛋白:型膠原、骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)和骨橋素(osteopontin,OPN)的表達。將轉(zhuǎn)染的各組MSCs分別與磷酸三鈣(tricalciumphosphate,TCP)復合后植入裸鼠體內(nèi),3周后取材,比較各組誘導異位成骨能力。結(jié)果ELISA檢測表明BMP-2基因修飾的MSCs可以有效表達BMP-2,且表達量在各年齡組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);各組ALP于誘導后第9天達高峰,但組間差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05);誘導后第7天,RT-PCR半定量檢測示各組均有成骨細胞特征性蛋白,即:型膠原、OPN及BSP的明顯表達,表達量在各組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);BMP-2基因轉(zhuǎn)染的MSCs與TCP復合后可誘導裸鼠體內(nèi)異位成骨,各組成骨量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論BMP-2基因修飾的老年大鼠MSCs可以恢復成骨分化能力,基因可能為老年性骨骼疾病提供一種新的途徑。
目的探討五味子對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用及其機理。方法將59只雌性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、假手術(shù)組、模型組、陽性對照組及五味子組,其中五味子組11只,其余每組12只。摘除大鼠雙側(cè)卵巢1個月后,五味子組灌服五味子水煎劑(1g/ml),陽性對照組予己烯雌酚(0.008mg/ml)灌胃3個月(5.6ml/kg)。對不脫鈣骨切片進行形態(tài)計量并檢測脛骨成骨細胞(OB)和骨髓基質(zhì)細胞(MSC)中護骨素(OPG)、核因子-κB受體活化因子配體(RANKL)蛋白表達。結(jié)果五味子組大鼠脛骨骨小梁體積百分比較模型組顯著增高,除骨皮質(zhì)類骨質(zhì)平均寬度外,骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、骨小梁礦化率術(shù)較模型組均顯著降低,OB及MSC中OPG蛋白表達明顯增高(P<0.05或P<0.01),OB中RANKL蛋白表達明顯降低(P<0.05)。結(jié)論五味子對卵巢切除大鼠骨質(zhì)疏松癥作用機理之一是通過促進OB和MSC中OPG的分泌,使之與RANKL的結(jié)合增多,進而破骨細胞的活性。