公司介紹     

生物分析方法開(kāi)發(fā)

分析方法驗(yàn)證

高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒開(kāi)發(fā)與定制

供科研使用，不得用于檢驗(yàn)。

 

泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司，目前可提供各種抗體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、分子生物學(xué)試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷(xiāo)售 ，布局全國(guó)市場(chǎng)。

我們致力于為高等院校、研究機(jī)構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動(dòng)物造模公司等科研單位，提供高質(zhì)量檢測(cè)試劑盒、方法學(xué)開(kāi)發(fā)及實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，為客戶的科學(xué)研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗(yàn)，是值得您信賴的科研伙伴！

企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備，并與知名高校、研究機(jī)構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。公司自成立以來(lái)，就非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)，我們采用了先進(jìn)的內(nèi)部供應(yīng)鏈信息處理平臺(tái)，客戶的需求可以準(zhǔn)確、處理。

      為每一位科研人員獻(xiàn)上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。

 

樣本處理：

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

 

 

注意事項(xiàng):

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

3. 板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射，不能使用過(guò)期產(chǎn)品。

7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

人WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1（WISP1）elisa試劑盒

C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)參與人體炎癥反應(yīng),是中的重要檢測(cè)指標(biāo)。家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)有表達(dá)和翻譯后修飾的功能,可規(guī)模化生產(chǎn),是外源重組蛋白理想的表達(dá)系統(tǒng),本研究嘗試?yán)迷撓到y(tǒng)表達(dá)重組人CRP蛋白。通過(guò)設(shè)計(jì)特異引物,以人的肝組織c DNA為模板,擴(kuò)增CRP目的基因,連接到p ColdTMII載體上,構(gòu)建了重組p ColdTMII-CRP表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化至E.coli BL21(DE3)中,誘導(dǎo)工程菌獲得包涵體蛋白,經(jīng)包涵體溶解,Ni-NTA柱純化,復(fù)性得到原核表達(dá)的重組人CRP蛋白,經(jīng)過(guò)SDS-PAGE,Western Blot鑒定,以及質(zhì)譜分析可以確定蛋白成功表達(dá)。以原核表達(dá)的重組人CRP為抗原,免疫新西蘭大耳兔,以弗氏完全佐劑免疫,一周后以弗氏不完全佐劑加強(qiáng)免疫,每周一次連續(xù)免疫四周,一次免疫前ELISA檢測(cè)抗血清效價(jià),達(dá)到目的效價(jià)一周后頸動(dòng)脈取兔全血,離心得抗CRP血清,ELISA檢測(cè)抗體效價(jià)在抗原濃度10μg/m L時(shí)抗血清效價(jià)達(dá)到1:64000。得到CRP多克隆抗體,Western Blot檢測(cè)得到目的條帶,可用于后續(xù)的研究中。PCR得到CRP目的基因,酶切連接到p Fast BacTMHTB轉(zhuǎn)移載體,得到重組p Fast BacTMHTB-CRP轉(zhuǎn)移載體,利用Bac-to-Bac系統(tǒng)轉(zhuǎn)化到E.coli Bm DH10Bac中,篩選出重組Bacmind-CRP。轉(zhuǎn)染Bm N細(xì)胞,5 d左右細(xì)胞發(fā)病,得到重組桿狀病毒v Bm His-CRP。

 

人WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1（WISP1）elisa試劑盒

通過(guò)檢測(cè)血清中p53蛋白及其抗體變化的ELISA試劑盒的研發(fā)需要大量制備p53蛋白.本研究通過(guò)構(gòu)建人野生型p53基因的原核表達(dá)質(zhì)粒pET-32a-p53,在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)得到p53包涵體蛋白,經(jīng)包涵體變性、親和純化、復(fù)性得到可溶p53蛋白.發(fā)現(xiàn)利用8M尿素對(duì)包涵體進(jìn)行變性溶解,經(jīng)鎳柱親和純化得到純度超過(guò)95%的變性蛋白.嘗試透析復(fù)性、稀釋復(fù)性和柱上復(fù)性3種方法分別對(duì)p53變性蛋白進(jìn)行復(fù)性.結(jié)果表明透析復(fù)性的復(fù)性率,這為原核表達(dá)制備p53提供了一種參考.本研究為ELISA法檢測(cè)血清中p53蛋白及其抗體相關(guān)試劑盒研發(fā)奠定了基礎(chǔ).