【產品名稱】

商品名稱：對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)熒光PCR檢測試劑盒

Name ：Nucleic acid detection kit for infectious muscle necrosis virus (IMNV) of shrimp (RT-PCR fluorescent probe method)

【包裝規(guī)格】48T/盒

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)熒光PCR檢測試劑盒【預期用途】

本試劑盒適用于檢測標本中指標的定量檢測，輔助診斷。

【試劑組成】

名 稱	規(guī) 格
酶液	50μL×1 管
反應液	1.0mL×1 管
陽性質控品	50μL ×1 管
陰性質控品	250μL ×1 管
核酸提取液	1.5ml×2管

詳見說明書

注：

1） 不同批號試劑不能混用。

2） 試劑盒內各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標示的檢測次數。

【檢驗原理】

本試劑盒對指標特異核酸序列設計引物和探針，用一步法熒光RT-PCR 技術對指標 RNA 進行體外擴增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)熒光PCR檢測試劑盒【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1 樣本前處理

【標本采集】

咽拭子：應使用與用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側扁桃體部位，應避免觸及舌 部 ； 迅 速 將 拭 子 放 入 標 本 采 集 管 中 ， 旋 緊 管 蓋 并 密 封 ， 以 防 干 燥 。

全血：疑似感染病人的靜脈血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管，8000rpm 離心 2min，取適量上清液于 1.5mL 滅菌離心管中。痰： 以清晨的 口痰為宜。先用清水漱口，囑患者用力咳出深部的痰于無菌樣本保存管，密封，即可送檢。

【標本采集】

病死或撲殺禽，取喉氣管、腦、胸肌、心肌和肺等組織；待檢活禽，用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物，置于 1mL 50%甘油生理鹽水中。

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但丌能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

1.2DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入 50μL 核酸提取液，100℃恒溫處理 10min，13,000rpm 離心 5min，取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2) DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生產的 DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.2 RNA 提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的RNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

試劑	反應液	酶液
用量	20μL	1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，21uL/管。

3. 加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4. PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

4.2 設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。

4.3 推薦循環(huán)參數設置：

步驟	循環(huán)數	溫度	時間	收集熒光信號
1	1 cycle	42℃	20min	否
2	1 cycle	95℃	10min	否
3	40 cycles	94℃	15sec	否
		55℃	30sec	是

對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)熒光PCR檢測試劑盒【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數不超過 5 次，有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

病死或撲殺動物，取水泡皮及水泡液；待檢活動物，取 O/P 液 2~3mL。

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

【產品圖片】

【生產企業(yè)】

企業(yè)名稱：上海烜雅生物科技有限公司

生產地址：金海公路3265號14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生產的對蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)熒光PCR檢測試劑盒質量高，價格低，售后有保證。為您的實驗保駕護航。

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本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷。

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