以下是細胞的訂購信息：

產(chǎn)品名稱：RSC96大鼠雪旺細胞

英文名稱：Schwann cells in RSC96 rats

規(guī)格：5×105cells/瓶

產(chǎn)品貨號：BH-C3019

培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS

運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

注意事項：

實驗進行前，無菌室及無菌操作臺（laminarflow）以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作；每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面；

操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作；無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作；

小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作，并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺（至少ClassⅡ）。操作過程中，應避免引起aerosol之產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。

操作流程：

1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。

1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：

1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。

1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。

1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。

1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。

1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 

1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

FGF14重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B) Protein

MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標簽) Protein

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標簽) Protein

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 標簽) Protein

PDGFC重組人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽) Protein

MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體

MMP9 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體

MOG 髓鞘少樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體

MRP1 多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體

MRP2 多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體

MRP3 多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體

MrpL28 線粒體核糖體蛋白L28抗體

MSH2 錯配修復蛋白2抗體

5 MethylCytosine 5甲基胞嘧啶抗體

MAL2 T淋巴細胞分化蛋白MAL2抗體

RNF61 環(huán)指蛋白61抗體

Muscarinic Acetylcholine receptor M3 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗體

MLARSC96大鼠雪旺細胞H1 錯配修復蛋白1抗體

Angiotensin II Type 2 Receptor 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體

MARCO 巨噬細胞清道夫受體抗體

Myf6 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體

MBD1 甲基化CpG結(jié)合蛋白抗體

微絲相關(guān)蛋白3樣抗體