上海一研生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
反應(yīng)五要素:
網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子*很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒 | Dictyocaulus spp.PCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
醋氟氫可的松標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 514-36-3 Tylosin Tartrate
氟馬西尼標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 78755-81-4 Tylosin
氟馬西尼相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Tubocurarine Chloride
氟馬西尼相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Trospium Chloride
氟馬西尼相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 1188-33-6 Tropicamide
雙氟美松叔戊酯標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 2002-29-1 Tromethamine
氟尼縮松標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 77326-96-6 Troleandomycin
氟尼辛葡甲胺標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 42461-84-7 Trisalicylic Acid
醋膚輕松標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 67-73-2 Triprolidine Hydrochloride
醋氟輕松標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 356-12-7 Tripelennamine Hydrochloride
熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 153954Trioxsalen
氟化牙粉:氟化鈉/二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Trimipramine Maleate
氟化牙粉:氟化鈉/碳?xì)溻c粉標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Trimethoprim
氟化牙粉:單氟磷鈉-碳鈣標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Trimethadione
氟化牙粉:單氟磷鈉/磷氫鈣標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Trimeprazine Tartrate
Trihexyphenidyl Hydrochloride
網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒
"別 名 A8 antibody BB 18; BB18; CD 100; CD100; CD100 antigen; Coll 4; COLL4; Collapsin 4; Collapsin4; GR3; Human semaphorin CD100 mRNA complete cds; Leukocyte activation antigen CD100; M sema G; MSEMA; SEM4D_HUMAN; Sema 4d; Sema domain immunoglobulin domain Ig transmembrane domain TM and short cytoplasmic domain semaphorin 4D ; Sema H; SEMA J; SEMA4D; Semacl 2; Semacl2; SemaH; SEMAJ; Semaphorin 4D; Semaphorin 4D precursor; Semaphorin C like 2; Semaphorin H; Semaphorin J; Semaphorin-4D; Semaphorin4D; SemaphorinJ; Semcl 2; Semcl2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
*類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight:
60, 126kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SEMA4D
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C."