山東富舜新材料科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 其他化工原料
山東富舜-食品級(jí)C.I.食用藍(lán)色2號(hào)-食用色素C.I.食用藍(lán)色2號(hào)
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)加工
所在地區(qū)
山東省濟(jì)南市
主營(yíng)產(chǎn)品
山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來(lái),以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿意的銷售服務(wù),贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理是什么
在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導(dǎo)致最da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時(shí)顏色也由棕色變?yōu)樗{(lán)色,該藍(lán)色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測(cè)量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線而確定。
考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,最da光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有最da光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。
該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,最xaio可測(cè)2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。
考馬斯亮藍(lán)有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速,常用來(lái)作為蛋白質(zhì)含量的測(cè)定??捡R斯亮藍(lán)R250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來(lái)對(duì)電泳條帶染色。
山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。
食品添加劑亮藍(lán)
帶金屬光澤的深紫至青銅色顆粒或粉末。無(wú)臭。耐光性及耐熱性強(qiáng)。對(duì)檸檬酸、酒石酸、堿穩(wěn)定。易溶于水(18.7g/100ml,21℃),0.05%中性水溶液呈清澈藍(lán)色。弱酸時(shí)呈青色,強(qiáng)酸時(shí)呈黃色,僅在煮沸并加堿時(shí)呈紫色。溶于乙醇(1.5g/100ml,95%乙醇溶液,21℃)。溶于甘油和丙二醇。與檸檬黃可配成綠色色素。
山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來(lái),以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿意的銷售服務(wù),贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)染色 使用說(shuō)明:
1. 常規(guī)染色脫色方法:
a. 電泳結(jié)束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
b. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色1小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。 注:具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)對(duì)最終的染色效果產(chǎn)生fu面影響。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液2-4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。 注:脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
f. 完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保 存在含20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。
2. 快速染色脫色方法:
a. 電泳結(jié)束后,取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對(duì)于膠濃度大于10%的膠比較堅(jiān)韌,在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損;對(duì)于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
b. 隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5-10分鐘。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。
f. 隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng)5-10分鐘。此時(shí)通??梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。
g. 更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟e和步驟f,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。