南京卡米洛生物工程有限公司
主營產品: ELISA試劑盒, 試劑盒, 科研ELISA試劑盒, 實驗室耗材, 常用小型儀器
人巨噬趨化因子(MCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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人巨噬細胞趨化因子(MCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人白介素10(IL-10)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白介素10(IL-10)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
人巨噬細胞趨化因子(MCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
人巨噬細胞趨化因子(MCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體50μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
人巨噬細胞趨化因子(MCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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