人網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人白介素2(IL-2)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白介素2(IL-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

人網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體50μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  所有孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

人網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

南京卡米洛生物工程有限公司，被行業(yè)內(nèi)評(píng)為優(yōu)秀企業(yè)，江蘇實(shí)驗(yàn)室聯(lián)盟企業(yè),,江蘇省質(zhì)量信用AAA級(jí)企業(yè)。主要從事各種細(xì)胞因子酶聯(lián)免疫試劑盒及其相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)，生產(chǎn)，銷(xiāo)售和技術(shù)上的服務(wù)、培訓(xùn)與咨詢。公司產(chǎn)品涉及許多生命科學(xué)研究領(lǐng)域，如胚胎學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)和神經(jīng)科學(xué)等等，特別是腫瘤研究領(lǐng)域。我們所研發(fā)的產(chǎn)品是致力于為中國(guó)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的科學(xué)家們提供研究所需要的高品質(zhì)產(chǎn)品，從而加速生物制藥和生命醫(yī)學(xué)市場(chǎng)的發(fā)展，提高疾病的診斷和治療水平，以造福于全人類。公司一直致力于各種細(xì)胞因子及其相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)，生產(chǎn)和銷(xiāo)售。卡米洛的產(chǎn)品覆蓋面廣，種類豐富，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，其生產(chǎn)的各種ELISA試劑盒、重組因子及抗體以其卓越的品質(zhì)贏得了廣大科研院所及臨床診斷機(jī)構(gòu)的青睞?？茁迳锕こ虉?jiān)持不懈的努力，已經(jīng)研發(fā)出一大批優(yōu)質(zhì)的試劑。以最優(yōu)質(zhì)的試劑提供給廣大科研工作者，是卡米洛生物一貫的愿望，也是做事的準(zhǔn)則！公司的宗旨是“以人為本，質(zhì)量第一，顧客至上”

人網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒