天津洋蔥亞細胞定位培養(yǎng)公司 河北洋蔥亞細胞定位培養(yǎng) 思特進
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司

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產(chǎn)品編號 10842459
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司主營:動植物,細菌,細胞生物實驗




武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。




目的:分析增強型綠色熒光蛋白(EGFP)與蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa細胞中的表達、亞細胞定位及其對細胞形態(tài)的影響。方法:用脂質(zhì)轉(zhuǎn)染胺(Lipofec-tAMINE 2000)為載體分別以Cθ-EGFP和pEGFP-N1轉(zhuǎn)染HeLa細胞,流式細胞儀分析其表達率,激...


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





重金屬轉(zhuǎn)運蛋白P-type ATPase(HMA)已被證實參與植物體內(nèi)的重金屬運輸,HMA5主要參與銅的轉(zhuǎn)運。在模式植物擬南芥、水稻和黃瓜中對HMA5基因進行了較多的研究,但是對豆科植物HMA5的研究鮮見報道。實驗室前期在天藍苜蓿中分離到一個與銅脅迫及共生結(jié)瘤相關(guān)的HMA5基因,為了對此類基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的作用進行深入研究,本研究對全基因組已測序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進行篩查,尋找HMA5同源基因并通過表達模式分析初步判斷其與共生結(jié)瘤的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上,以其中的MTR_8g079250基因為對象,進行亞細胞定位、組織表達、RNA干擾和過量表達等研究,初步鑒定該基因在共生結(jié)瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亞細胞定位構(gòu)建MTR_8g079250的洋蔥表皮亞細胞定位載體,通過基因槍轟擊轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細胞,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在細胞膜上表達,在細胞核上也有微量的表達;構(gòu)建MTR_8g079250的葉片亞細胞定位載體,通過根癌農(nóng)介導(dǎo)注射葉片的方式進行轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明目的基因主要定位在細胞膜和細胞核上;2、MTR_8g079250的組織表達構(gòu)建PMTR_8g079250::GUS融合表達載體,通過農(nóng)發(fā)根轉(zhuǎn)化的方式轉(zhuǎn)入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進行GUS染色觀察。

武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。





F-box蛋白通過在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識別底物蛋白而參與細胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細胞凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號傳導(dǎo),并且與植物對非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點。經(jīng)過長時間的進化和對不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢來研究植物的抗逆機制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫中挑選到兩個F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達,采用RACE技術(shù)其全長,并對目的基因進行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達譜分析,旨在為進一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長發(fā)育及在逆境信號傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開放閱讀框(ORF)長1093bp,編碼一條345個氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達,在花中表達極高。

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