武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營：動(dòng)植物，細(xì)菌，細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

幾丁質(zhì)酶(chitinase)是一種能夠?qū)锥≠|(zhì)水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,廣泛存在于植物細(xì)胞中,是抗真菌防衛(wèi)反應(yīng)體系的重要組成部分.該文深入分析了1種三七幾丁質(zhì)酶基因PnCHI1的功能.構(gòu)建PnCHI1的亞細(xì)胞定位載體,轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá),在激光掃描共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)PnCHI1定位于細(xì)胞壁中.構(gòu)建PnCHI1的原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)并純化獲得重組蛋白,體外平板抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PnCHI1原核重組蛋白對(duì)尖孢鐮刀菌、茄腐鐮刀菌、輪枝鐮刀菌3種三七根腐病菌的菌絲生長具有很強(qiáng)的抑制活性.采用反向遺傳學(xué)技術(shù)驗(yàn)證PnCHI1的功能,通過根癌農(nóng)介導(dǎo)將PnCHI1轉(zhuǎn)入中過量表達(dá).qRT-PCR分析結(jié)果表明PnCHI1在T2代轉(zhuǎn)基因中大量表達(dá),同時(shí)葉片接種實(shí)驗(yàn)顯示PnCHI1轉(zhuǎn)基因?qū)η迅牭毒目剐栽鰪?qiáng)明顯.結(jié)論:PnCHI1是定位于細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)酶,體外能抑制幾種三七根腐病真菌,在過表達(dá)大大提高了對(duì)茄腐鐮刀菌的抗性,推測PnCHI1是三七中參與根腐病防衛(wèi)反應(yīng)的重要抗病基因.

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