武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營：動植物，細(xì)菌，細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

大豆[Glycine max(L.)Merrill]是我國主要的糧食作物和油料作物,但土壤鹽漬化成為影響大豆生長和產(chǎn)量的主要限制因素之一。近年來,基因工程技術(shù)被廣泛應(yīng)用于提高植物的耐鹽性,將抗逆基因?qū)雰?yōu)良大豆品種,培育抗逆高產(chǎn)新品系,為解決這一問題提供了新途徑。目前已有多個耐鹽相關(guān)基因應(yīng)用于植物抗逆研究,其中Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因家族研究較為深入,其主要作用是通過將細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的Na+外排到胞外或者將Na+區(qū)隔化到液泡中,來維持細(xì)胞內(nèi)的Na+穩(wěn)態(tài)和Na+/K+比相對穩(wěn)定,從而減少鹽脅迫對植株造成的傷害。但有關(guān)大豆Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的生物學(xué)功能分析以及應(yīng)用的研究還很少。本研究以超表達(dá)Gm NHX1基因的擬南芥及酵母nhx1缺失突變體為材料,通過非損傷微測技術(shù)、real-time PCR以及酵母互補(bǔ)試驗(yàn),驗(yàn)證Gm NHX1基因的耐鹽功能;借助基因槍法轉(zhuǎn)化洋蔥,觀察Gm NHX1蛋白的亞細(xì)胞定位。在此基礎(chǔ)上,利用根癌農(nóng)介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化法進(jìn)行Gm NHX1基因的遺傳轉(zhuǎn)化。

谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門戶”,對植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有著極為重要的影響。高等植物中的GS同工酶主要分為兩類:胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級氨及再同化從植物體內(nèi)各個N循環(huán)途徑所釋放的氨;質(zhì)體型GS2同化由NO3--N還原而來及光呼吸過程所釋放的氨。N素供應(yīng)對甜瓜的生長發(fā)育、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)形成有非常重要的影響,目前甜瓜N素代謝研究還停留在N營養(yǎng)生理與果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量層面,在分子機(jī)理水平的研究報道很少,尤其是對與N素同化和利用效率緊密相關(guān)的GS酶基因的研究還是空白。因此,本文以甜瓜作為對象,在從甜瓜中出胞質(zhì)型GS基因M-GS1的基礎(chǔ)上,對M-GS1及課題組到的甜瓜質(zhì)體型GS基因M-GS2的基因組拷貝數(shù)、表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及生化特性、在甜瓜中的表達(dá)調(diào)控特征等進(jìn)行了研究和對比分析,從基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞水平對甜瓜GS基因進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證和鑒定,開展了甜瓜N營養(yǎng)代謝的分子生理研究;進(jìn)而在植株水平研究M-GS1在轉(zhuǎn)基因超量表達(dá)后提高植株N素同化效率的潛能,為甜瓜GS基因的應(yīng)用、利用GS基因改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依據(jù)。

蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類作物,具有較高的營養(yǎng)價值,在中國乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產(chǎn)物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產(chǎn)物在植物防御、風(fēng)味形成以及人類預(yù)防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過程中的關(guān)鍵調(diào)控基因,其表達(dá)量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調(diào)控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領(lǐng)域關(guān)于MYB28和MYB29的分子特性、表達(dá)特征尚未見報道。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過比對擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實(shí)驗(yàn)室蘿卜轉(zhuǎn)錄組序列,蘿卜中調(diào)控硫苷合成的兩個關(guān)鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細(xì)胞定位、轉(zhuǎn)錄活性和表達(dá)特征等多方面進(jìn)行研究,以期,增加對蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達(dá)特征的認(rèn)識,為后期通過基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎(chǔ)。