浙江洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)值得信賴(lài) 湖北洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng) 思特進(jìn)
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產(chǎn)品編號(hào) 8758559
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營(yíng):動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)




武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因?yàn)橹行?探討致病相關(guān)基因的種類(lèi)及其功能,生理小種和致病基因的關(guān)系,致病基因的遺傳分離和在群體中的轉(zhuǎn)移規(guī)律等等,能夠?yàn)樗究刮列匝芯亢偷疚敛』瘜W(xué)防治、生物防治提供理論基礎(chǔ)。 本研究利用在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導(dǎo)的稻瘟菌T-DNA插入突變體庫(kù),挑選了7個(gè)致病力缺陷的突變體,提取基因組DNA,PCR檢測(cè)確認(rèn)T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技術(shù)對(duì)T-DNA右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個(gè)突變體都獲得了特異條帶。對(duì)這些特異條帶進(jìn)行并測(cè)序,其中5個(gè)測(cè)序成功,另外2個(gè)測(cè)序失敗。將成功的序列與稻瘟菌基因組和NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),發(fā)現(xiàn)1個(gè)為載體pCAMBIA1300序列,4個(gè)與稻瘟菌的基因組相似性達(dá)93%~99%,認(rèn)為是T-DNA插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





F-box蛋白通過(guò)在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識(shí)別底物蛋白而參與細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動(dòng)。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過(guò)SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號(hào)傳導(dǎo),并且與植物對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對(duì)植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類(lèi)作物,主要生長(zhǎng)在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的進(jìn)化和對(duì)不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢(shì)來(lái)研究植物的抗逆機(jī)制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫(kù)中挑選到兩個(gè)F-box蛋白基因在干旱脅迫下高效表達(dá),采用RACE技術(shù)其全長(zhǎng),并對(duì)目的基因進(jìn)行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)譜分析,旨在為進(jìn)一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長(zhǎng)發(fā)育及在逆境信號(hào)傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)1093bp,編碼一條345個(gè)氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點(diǎn)為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達(dá),在花中表達(dá)極高。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





選取含有氯嘧磺隆抗性標(biāo)記的ILV1基因和報(bào)告基因GFP二元載體的農(nóng)AGL-1,采用單因子和雙因子方法研究根癌農(nóng)AGL-1介導(dǎo)柱花草菌CH008轉(zhuǎn)化過(guò)程中各主要因素對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響,優(yōu)化構(gòu)建ATMT轉(zhuǎn)化柱花草膠孢菌體系條件,使轉(zhuǎn)化效率達(dá)到300~400個(gè)轉(zhuǎn)化子/106個(gè)孢子,即根癌農(nóng)AGL-1濃度OD600=0.8,菌分生孢子濃度為1×106個(gè)/mL,AS濃度為100 μmol/L,誘導(dǎo)時(shí)間為6 h,共培養(yǎng)溫度和時(shí)間分別為25 ℃和4 d。經(jīng)PCR檢測(cè)都有GFP片段,并能夠表達(dá)綠色熒光蛋白。這為進(jìn)一步開(kāi)展菌對(duì)柱花草的致病機(jī)理研究提供了依據(jù),優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系有利于后續(xù)突變體庫(kù)的擴(kuò)大、篩選突變體和致病功能基因的研究。

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