測定意義:
土壤總磷包括有機(jī)磷和無機(jī)磷,其中無機(jī)磷能夠直接被植物利用。土壤有機(jī)磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷。同時測定土壤總磷、有機(jī)磷和無機(jī)磷,可以全面反映土壤磷營養(yǎng)狀況。
測定原理:
利用鉬藍(lán)法定磷。取一份土樣,通過浸提法測定土壤無機(jī)磷含量;另外取一份土樣,經(jīng)高溫灼燒后,土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷,測得土壤總磷含量;總磷含量減去無機(jī)磷含量,即可計算出有機(jī)磷含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋,分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐,1mL玻璃比色皿、蒸餾水、100目篩子(可更小)。
土壤不同形態(tài)磷提取:
1. 無機(jī)磷:稱取通過100目篩子的風(fēng)干土樣0.1g,轉(zhuǎn)移到10 mL離心管,加入10mL試劑一,震蕩混勻,然后置于45℃水浴1h,8000g,25℃離心10min,取上清液一,用于無機(jī)磷含量測定。
2. 總磷提取:取通過100目篩子的風(fēng)干土樣,550℃灼燒1h,冷卻后稱取約0.1g,轉(zhuǎn)移到10 mL離心管,加入10mL試劑一,震蕩混勻,然后置于45℃水浴1h,8000g,25℃,離心10min,取上清液二,用于總磷含量測定。
測定步驟:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 打開水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管:取EP管,依次加入500μL蒸餾水,500μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液,450μL蒸餾水,500μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測定管:取EP管,依次加入50μL上清液一或者上清液二,450μL蒸餾水,500μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A測定管。