L半乳糖酸1 4內(nèi)酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒_50管/48樣(之禮生物提供)
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L半乳糖酸1-4內(nèi)酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒-50管-48樣(之禮生物提供)

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品牌 之禮生物
規(guī)格 50管/48樣
測定方法 分光光度法
用途 僅供科研使用
產(chǎn)品包裝 液體盒裝
最小起訂 1盒起訂
供應(yīng)商 上海之禮生物科技有限公司
保持期 6個月
保存條件 低溫、避光保存
供貨數(shù)量 629
商品介紹
?科研提供 L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒_50管/48樣

測定意義：
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜，負(fù)責(zé)催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步，也是該途徑的關(guān)鍵酶之一，對植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。

測定原理：
Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原細(xì)胞色素c（Cyt c），還原型Cyt c在550nm有吸收峰；測定還原型Cyt c增加速率，來計算Gal LDH活性。
自備儀器和用品：
臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提取：
按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。13000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。

Gal LDH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到550nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min。
3. 依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL上清液、800μL預(yù)熱的試劑二和100μL試劑三，迅速混勻后于550nm比色，記錄10s和130s的吸光值A(chǔ)1和A2，△A = A2﹣A1。

Gal LDH活性計算公式：
(1). 按蛋白濃度計算
Gal LDH活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘還原1nmol Cyt c 為1個酶活單位。
Gal LDH (nmol/min/mg prot) = △A÷ε÷d×V反總×109÷（Cpr×V樣）÷T
=289×△A ÷Cpr
(2). 按樣本質(zhì)量計算
Gal LDH活性單位定義：25℃中每克樣品每分鐘還原1nmol Cyt c 為1個酶活單位。
Gal LDH (nmol/min/g鮮重) = △A÷ε÷d×V反總×109÷（W×V樣÷V樣總）÷T
=289×△A ÷W
ε：還原型Cyt c摩爾消光系數(shù)，17.3×103L/ mol/cm；d：比色皿光徑(cm)，1cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL=0.001 L；109：1mol=1×109nmol；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，100μL=0.1mL；Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL，蛋白質(zhì)濃度需要另外測定，建議使用本公司蛋白質(zhì)含量BCA試劑盒；V樣總：加入提取液體積，1mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，2min。
注    意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。


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公司名稱 上海之禮生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 夏力 （QQ：2881498548）
電話 钺钹钳-钼钷钻钷钼钻钶钶
手機 钳钼钻钺钺钷钷钳钺钺钴
地址 上海市閔行區(qū)
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