支原 體 檢測試劑盒（PCR方法）
支原 體 檢測試劑盒（PCR方法）
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支原 體 檢測試劑盒（PCR方法）

支原-體-檢測試劑盒（PCR方法）

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聯(lián)系人 白萱萱

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貨號(hào) ZK-PL4008
規(guī)格 50次
包裝 盒
品牌 子科生物ZIKER
保存條件 -20度
保質(zhì)期 有效期12個(gè)月
廠家 子科生物
產(chǎn)地 深圳
商品介紹

支原體檢測試劑盒（PCR方法）

貨號(hào)：ZK-PL4008

品牌：子科生物/ZIKER

描述：

支原體污染已經(jīng)成為細(xì)胞培養(yǎng)中高度重視的問題，因此定期進(jìn)行支原體污染檢測十分必要。本試劑盒采用PCR方法，能特異性檢測各種培養(yǎng)細(xì)胞生物材料（如細(xì)胞培養(yǎng)物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分泌物、動(dòng)物血清等）中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物針對(duì)支原體 16s rRNA 序列保守區(qū)域設(shè)計(jì)，可直接使用細(xì)胞培養(yǎng)液作為 PCR 模板，特異性擴(kuò)增支原體DNA，搭配配套的 Mix（2×）組分，一小時(shí)內(nèi)即可完成，靈敏度高，可檢測低至20個(gè)拷貝的支原體。


效期：有效期12個(gè)月


儲(chǔ)存與運(yùn)輸：冰袋（wet ice）運(yùn)輸；-20℃保存


組成：

PCR Mix（2×）

1 mL

Primer Mix

100 μL

Positive Control

50 μL

Free Water

1 mL

操作步驟
1. 樣品準(zhǔn)備：取適量待檢細(xì)胞培養(yǎng)上清于潔凈的PCR 管中，利用 PCR 儀 95℃熱處理5 min后作為模板。血清樣本可用Free  Water 稀釋后，取適量樣本于潔凈的PCR管中，利用PCR儀95℃熱處理 5min 后作為模板；
2. PCR 體系配制：每次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陰性對(duì)照（將 1μL待檢樣品換成等量的Free  Water）與陽性對(duì)照（在1μL待檢樣品中加入0.5μL Positive Control 后一起作為Template），實(shí)驗(yàn)時(shí)戴一次性口罩與手套，謹(jǐn)慎操作，防止操作不當(dāng)引入外源支原體污染；

Component

Volume

Template

1 μL

Primer  Mix

2 μL

PCR Mix（2×）

10 μL

Free   Water

To 20 μL


3. PCR 程序設(shè)置：

Step

Temperature

Time

Cycles

Initial Denaturation

98℃

2 min

1

Denaturation

98℃

20 s

30

Annealing

56℃

25 s

Extension

72℃

10 s

Final extension

72℃

5 min

1

Hold

4-16℃

Forever

4. 凝膠電泳：取10μL PCR 產(chǎn)物，使用 1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測；
5. 結(jié)果分析：每次實(shí)驗(yàn)通過與陰性對(duì)照、陽性對(duì)照檢測結(jié)果比較確認(rèn)樣品支原體污染情況，陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對(duì)照檢測結(jié)果中有條帶很有可能是PCR體系中出現(xiàn)污染，建議重新實(shí)驗(yàn)確認(rèn)結(jié)果。如有必要，也可對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)測序，以確定具體的支原體種屬。



注意事項(xiàng)：
1. 本試劑盒可以檢測M.orale，M.arginini，M.bovis，M.fermentans，M.gallisepticum，M.hominis， M.pirum，Ureaplasmaspp，M.hyorhinis，M.pneumoniae，A.laidlawii等至少 11 種以上支原體污染。
2. 所有試劑在使用前于冰上徹底解凍、混勻，使用完畢后于-20℃保存。
3. 每次實(shí)驗(yàn)必須設(shè)置陰性對(duì)照、陽性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)組建議設(shè)置樣品模板梯度。
4. 操作時(shí)必須佩戴口罩，嚴(yán)格按照 PCR 操作標(biāo)準(zhǔn)，防止引入外源污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5. 為了確保細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的可靠性及穩(wěn)定性，建議定期進(jìn)行支原體污染檢測。
6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


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公司名稱 深圳子科生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 白萱萱 （QQ：373419706）
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