新型防霉劑雙乙酸鈉對(duì)球毛殼和黃曲霉兩種霉菌的抑制作用 , 并用目前應(yīng)用廣泛 的防腐劑苯甲酸同其作對(duì)照實(shí)驗(yàn) 。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明雙乙酸鈉是一種優(yōu)良的防霉劑 , 其防霉效果優(yōu)于苯甲酸 。通過雙乙酸鈉對(duì)霉菌抑制作用的研究為其在食品 、 糧食及飼料等領(lǐng)域中的防霉保鮮應(yīng)用提供一定的理論依據(jù) 。谷物需要貯存保管 , 近年來 , 我國(guó)的飼料工業(yè)發(fā)展也很快 。因此 , 開發(fā) 、生產(chǎn)和大規(guī)模應(yīng)用雙乙酸鈉對(duì)促進(jìn)我國(guó)食品工業(yè) 、 糧食谷物和飼料工業(yè)生產(chǎn) 、 貯存與運(yùn) 輸具有重要意義 。雙乙酸鈉在食品 、 糧食及飼料等領(lǐng)域中的防霉保鮮應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1. 實(shí) 驗(yàn)

1 .1儀 器與設(shè)備空氣浴振蕩器 、 手提式壓力蒸汽消毒器 、 電 熱恒溫培養(yǎng)箱 、 表面皿 、 脫脂棉團(tuán) 、 錐形瓶 、 接種 環(huán) 、 電子天平 。

1 . 2 實(shí)驗(yàn) 材料和 方法

1 . 2 . 1 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)菌種 : 黃曲霉 、 球毛殼 防霉實(shí)驗(yàn)菌 , 均由中科院微生物研究所 提供 。液體培養(yǎng)基 : 黃曲霉的培養(yǎng)基為查氏培養(yǎng)基 , 球毛殼菌種的培養(yǎng)基為綜 合馬鈴薯培養(yǎng)基 。固體培養(yǎng)基 : 在液體培養(yǎng)基 中加人適量瓊月旨。防霉劑 : 雙 乙酸鈉 、 苯甲酸 。

1 .2 .2 實(shí)驗(yàn)方法 在無菌條件下將已活化的黃曲霉 、 球毛殼分別接種在查 氏 培養(yǎng)基和綜合馬鈴薯培養(yǎng)基上 , 分別量取150mL 的液體培養(yǎng)基 , 加人防霉 劑 , 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0 . 3 % 、 0 . 1% , 加人適 量瓊脂 。若不添加任何防霉劑 , 霉菌菌種在各自的瓊脂平板上生 長(zhǎng)得最 好 , 若在培養(yǎng)基中添加防霉劑就會(huì)抑制其生長(zhǎng) , 防霉效果越好對(duì)霉菌的生長(zhǎng)抑制作用 也越大 。所以可在培養(yǎng)基中添加防霉劑來抑制菌種生長(zhǎng) , 根據(jù)菌種生長(zhǎng)的情況 比較 防霉劑對(duì)霉菌的抑制作用 。陽性對(duì)照組 : 加入苯甲酸 , 質(zhì)量 分 數(shù) 為 0 . 3 % 、 0 . 1% ?？?白對(duì)照組 : 不添加任何防霉劑 。實(shí)驗(yàn)組 : 加入雙乙酸鈉 , 質(zhì) 量分?jǐn)?shù)為 0 . 3 % 、 0 . 1 % 。以上各組均做 10 次平行實(shí)驗(yàn) 。實(shí)驗(yàn)過程 中 , 無論是操作中的儀器還是使用的培養(yǎng)基及任何試劑都保持無菌狀態(tài) 。為了便于觀察 , 即用肉眼便可數(shù)出菌種個(gè) 數(shù)，, 在加人防霉劑的固體培養(yǎng)基內(nèi)用平板劃線接種上振蕩培養(yǎng)的菌種 。然后放置培養(yǎng)箱 內(nèi) 待觀察 。

2、 結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示 , 采用當(dāng)代生物統(tǒng)計(jì)工作的基本工具之一 t 檢 驗(yàn) 法 側(cè), 進(jìn)行兩兩比較 t 檢驗(yàn) 。該檢驗(yàn)是小樣本成組數(shù)據(jù)平均數(shù)的假設(shè)檢驗(yàn) , 即兩 組數(shù)據(jù)以組平均數(shù)進(jìn)行相互比較 , 來檢驗(yàn)其差異的顯著性 , 經(jīng)常用于處理生物學(xué)研究中比較不同處理效應(yīng)的差異顯著性 。概率值 p < 0 . 05 達(dá)到差異顯著標(biāo)準(zhǔn) , 即實(shí)驗(yàn)結(jié)果有顯著差異 , 其差異不是由誤 差所致 , 而是由于總體參數(shù)不同所引起的 。p < 0 . 01 達(dá)到差異極顯著標(biāo)準(zhǔn) , 即實(shí)驗(yàn)結(jié)果有明顯差異 。

2 . 1 黃曲霉在雙乙酸鈉 ( S D A )和 苯 甲酸 的 培 養(yǎng)基 內(nèi)生長(zhǎng)情況黃曲霉在 0 . 3 % 、 0 . 1% 的雙乙酸鈉 ( SD A ) 和苯甲酸的培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)情況見表1

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由表 1 可知 , 雙乙酸鈉和苯甲酸對(duì)黃曲霉的生長(zhǎng)都有良好的控制作用 , 二者質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0 . 3 % 時(shí)防霉效果接近 , 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0 . 1% 時(shí)二者防霉效果與空白相 比都有極顯著差異 , 雙乙酸鈉優(yōu)于苯甲酸 , 由此可 知雙乙酸鈉具有良好的防霉 性能 ,且 防霉劑含 量越高 , 抑制作用 越顯著 。

2 .2 球毛 殼在雙 乙 酸鈉 ( SD A )和 苯甲酸的培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)情況 球毛 殼在 0 . 3 % 、 0 . 1% 雙乙酸鈉 ( SDA ) 和 苯 甲酸 的培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)情況見表 2 。

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由表 2 可 知 , 雙乙酸鈉和苯甲酸對(duì)球毛殼的生長(zhǎng)抑制作用比黃曲霉的差 。二 者質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為 0 . 3 % 時(shí)防霉效果接近 , 但質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0 . 1% 時(shí)雙乙酸鈉的防霉效果與苯甲酸 的防霉效果有 顯著差 異 , 由此可 知 , 雙乙酸鈉具有良好的防霉 性 能 , 優(yōu)于苯甲酸 。防霉即是人工來抑制糧食或谷物霉菌的生長(zhǎng) 。防霉劑 主要使微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋 白變性和干擾生理生化反應(yīng) , 達(dá)到抑制或殺死細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖 。雙乙酸鈉對(duì)菌類 (包括真菌 、 霉菌 、 細(xì)菌 )具有很強(qiáng)的抑制作用 。其分子內(nèi)的單分子乙酸可以降低物質(zhì)的 p H 值 , 并且與醋化合物相溶性較好 , 因而可以透過細(xì)胞壁 , 有效地滲透進(jìn)入菌類組織的細(xì)胞中 , 干擾細(xì)胞間酶的相互作用 , 促使菌體蛋 白質(zhì)的變性 , 且改變 細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu) , 達(dá)到菌體脫水死亡目的 , 起到抗菌防腐的作用 。目前常用的防腐防 霉劑有丙酸 及其鹽類(使用范 圍較窄 ) ; 山梨酸及其鹽類 (制取產(chǎn)品的原料不很常見 , 成本高 , 收率也不 高) ; 苯甲酸及其鹽類 ( 目前我國(guó)大量生產(chǎn) , 應(yīng) 用廣 泛 , 但超過 一定濃 度用量有不良味 道 ) 。雙乙酸鈉作為一種新型防霉劑 , 與上述 防腐防霉劑相 比具有 一些明顯 的優(yōu)點(diǎn) , 如高效性 、 安全性 、 營(yíng)養(yǎng)性 、 適 口 性 , 生產(chǎn)技術(shù)簡(jiǎn)單 , 設(shè)備裝置投資少 , 原料易得等 。它用于糧食和飼料的防霉的市場(chǎng)空間將是巨大的 。菌抑制作用的研究 , 為新 型防霉劑雙乙酸鈉運(yùn)用于糧食 、 食品 、 飼料的等領(lǐng)域中的防霉保鮮應(yīng)用提供一定的理論依據(jù) 。