病毒是無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的小,簡(jiǎn)單的微生物。但病毒的感染很普遍,在微生物引起的感染性疾病多數(shù)由病毒引起。病毒感染在感染性疾病中占有重要地位,盡獲得病毒的實(shí)驗(yàn)診斷,對(duì)控制病毒的傳播,疾病的診斷和防治有*其重要意義,而且通過(guò)實(shí)驗(yàn)診斷還可以發(fā)現(xiàn)新病毒。目前的病毒檢測(cè)技術(shù)主要有傳統(tǒng)的病毒分離培養(yǎng),中和實(shí)驗(yàn),凝集試驗(yàn),電鏡技術(shù)等;學(xué)的熒光檢測(cè),酶法,層析法,放射法等;分子生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng),基于核酸序列的擴(kuò)增技術(shù),環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),XtagRVP技術(shù),生物芯片技術(shù)等。
病毒核酸分子檢測(cè):
1、基因芯片:基因芯片(genechip)又稱基因微矩陣(DNAmicroarry)具有微型化、高通量、并行處理易于自動(dòng)化等優(yōu)越性,它將大量的靶基因片段有序、高密度地排列在玻片、硅等載體上,用熒光檢測(cè)后,通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)比較和分析,一次試驗(yàn)就可對(duì)上萬(wàn)種基因進(jìn)行**準(zhǔn)確、的檢測(cè)。
2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR:目前有效、靈敏的方法就是實(shí)時(shí)熒光定量PCR(realtimeRT-PCR),根據(jù)目標(biāo)核酸基因來(lái)設(shè)計(jì)引物實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)的檢測(cè),已廣泛應(yīng)用在樣品的檢測(cè)。realtimeRT-PCR是將熒光能量傳遞技術(shù)應(yīng)用于PCR儀中,在PCR的反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用**的熒光信號(hào)積累來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,終通過(guò)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知得模板進(jìn)行定量分析的方法。
抗病毒檢測(cè)形態(tài)學(xué)檢查:
病毒檢測(cè)形態(tài)學(xué)檢查及診斷:
1、光學(xué)顯微鏡:直接觀察到較大的病毒體(如痘病毒)、包涵體狂犬病毒感染一一嗜酸性包涵體。
2、掃描電子顯微鏡:用于觀察病毒和表面結(jié)構(gòu)和附屬結(jié)構(gòu)等。
3、透射電子顯微鏡:用于觀察病毒的大小、形態(tài)與結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)的微結(jié)構(gòu)等。
抗病毒檢測(cè)方法:
病毒的分離與培養(yǎng):主要有細(xì)胞培養(yǎng)法、雞胚培養(yǎng)法、動(dòng)物接種法等,而對(duì)細(xì)胞、雞胚不敏感,又沒有合適動(dòng)物模型的病毒,可采用基因克隆的方法。
1、細(xì)胞培養(yǎng)法:二倍體細(xì)胞株來(lái)源于正常人胎兒組織,主要用于培養(yǎng)病毒制備等;原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和后立即進(jìn)行培養(yǎng);傳代細(xì)胞來(lái)源于細(xì)胞或細(xì)胞株傳代過(guò)程中變異的細(xì)胞。
2、雞胚培養(yǎng):雞胚培養(yǎng)法是用來(lái)培養(yǎng)某些對(duì)雞胚敏感的動(dòng)物病毒的一種培養(yǎng)方法,此方法可用以進(jìn)行多種病毒的分離、培養(yǎng),勒的滴定,中和試驗(yàn)以及抗原和的制備等。
3、動(dòng)物接種:常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有、乳鼠、、家兔猴和雞等;常用的接種途徑包括皮下、皮內(nèi)、腹腔、靜脈、角膜、鼻腔及腦內(nèi)接種等方式。
中科檢測(cè)可以根據(jù)各類候選病毒是否易于培養(yǎng)和檢測(cè)、生長(zhǎng)是否穩(wěn)定、對(duì)消毒因子的抵抗力在同類微生物中是否具有代表性,對(duì)人畜是否或弱毒、試驗(yàn)周期是否適宜,是否已有研究基礎(chǔ)、能否進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化等多種因素,開展病毒滅活試驗(yàn),并且具備病毒殺滅試驗(yàn)的生物等級(jí)2級(jí)(P2)實(shí)驗(yàn)室的病毒檢測(cè)中心,可進(jìn)行消毒器械、消毒劑、抗病毒材料及其它產(chǎn)品的病毒檢測(cè)報(bào)告。