登 革熱IgG試劑盒（ELISA）

通用名稱：登 革熱IgG試劑盒（ELISA）

英文名稱：Dengue virus IgG ELISA

產品規(guī)格：96T

預期用途

登 革熱IgG試劑盒可用于人血清、血漿中抗登 革熱病毒IgG抗體的定性檢測。

檢測原理

IgG抗體的定性酶免 檢測利用的ELISA技術。微孔板上預先包被了結合樣品相關抗體的登 革熱病毒2型抗原。洗板除去未結合的樣品物質后 ，加入辣根過氧酶標記的抗人IgG酶聯(lián)物。這一酶聯(lián)物可與捕獲到的登 革熱病毒特異性抗體結合。加入能產生藍色反應產物的TMB底物液后，如果顯示藍色則可知已形成免疫復合物。所顯示顏色的強度與樣品中登 革熱病毒特異性IgG抗體的量成正比。加入硫酸以終止反應,以便產生黃色的終點顏色。用一酶標儀在450m處讀取OD值。

登 革熱IgG試劑盒組成成分

◆微孔板：12×8可拆板條，包被有登 革熱2型抗原，真空密封于鋁鉑金屬袋中。

◆樣品稀釋液：1瓶，內含100ml樣品稀釋用緩沖液，pH2±0.2，液體為黃色，待用，白蓋。

◆終止液：1瓶，內含15ml硫酸，0.2mol/l；待用，紅蓋

◆洗滌液（20×濃縮）：1瓶，50ml，含20倍濃縮的樣品洗滌液，pH7.2±0.2，白蓋

◆酶聯(lián)物：1瓶，藍色，待用，黑蓋。

◆底物液：1瓶，含15ml，待用，黃蓋。

◆登 革熱 IgG陽性質控：1瓶，2ml；黃色，待用，紅蓋

◆登 革熱 IgG臨界質控：1瓶，3ml；黃色，待用，綠蓋

◆登 革熱 IgG陰性質控：1瓶，2ml；黃色，待用，藍蓋

檢測步驟

請至少做以下幾個孔：

1孔（例A1）做空白對照孔，1孔（例B1）做陰性質控。

2孔（例C1+ D1）做臨界質控，1孔（例E1）做陽性質控。

1）控品和已稀釋好的樣品分別100μl加入到相應的微孔中，留下A1做空白對照孔。

2）蓋板。

3）37±1℃下溫育1h±5min

4）溫育后，移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，用300μl洗滌液洗板3次。避免反應孔中的液體濺出。每次洗板間的浸潤時間都應大于5秒。*在吸水紙上拍干。

5）除空白孔外，在每一微孔中都加入100μl登 革熱抗IgG酶標物，蓋板。

6）室溫下溫育30，避免太陽直射

7）重復步驟4

8）在每一微孔中加入100μlTMB底物液

9）室溫下（20-25℃）避光溫育15min

10）按加TMB底物液的順序和速度在每一微孔中加入100μl終止液。溫育之后，包被板內試劑的顏色由藍色變?yōu)辄S色

11） 加終止液后30min之內在450/620nm處讀取OD值。

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