武漢思特進科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
湖北動物全自動生化檢測
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司主營:動植物,細菌,細胞生物實驗
與血漿儲存要求
大多數(shù)生化分析好的時間是收集后2小時內(nèi)在室溫下進行分析。如果或血漿樣品不能在收集后2小時內(nèi)進行處理,可將樣品(放在加蓋的試管中)放入4℃冰箱中短期儲存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中長期儲存(1周至6個月)。但有些指標檢測例外,例如氨、乳酸鹽和血氣分析需要在采集后并在冰浴或4°C立即被分析。膽紅素在暴露于直射光時會降解,因此血液用于膽紅素分析應(yīng)該避光(可用鋁箔包裹離心管)。檢測乳酸脫氫酶建議室溫儲存。
SSC=150mMNaCl,15mM檸檬酸鈉溶液(pH7.4)
HCl處理:對樣本進行20-30min的200mMHCl處理,可將蛋白抽提,并將核酸序列進行一定程度的水解,增加雜交檢測的信噪比。
去垢劑處理:如果對樣品的固定、脫水、包埋等預(yù)處理過程不足以將脂膜成分破壞暴露核酸,可對樣品進行額外的蛋白去垢劑處理(如TritonX-100和SDS)。
蛋白酶處理:樣品中待雜交的核酸序列常與蛋白纏繞交聯(lián)在一起,樣品的固定步驟更是加劇了蛋白的交聯(lián)程度,因此預(yù)滲透是核酸雜交前的常規(guī)步驟,通常通過蛋白酶K的消化作用來完成。根據(jù)不同的文獻來源,蛋白酶K的工作濃度通常設(shè)為10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMCaCl2,pH7.4,酶濃度可根據(jù)具體樣品進一步優(yōu)化),對樣品進行37°C7.5–30min的處理。染色體涂片或核片的蛋白酶K處理濃度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文獻指出,固定石蠟包埋的組織切片樣品,使用胃蛋白酶(500μg/ml,溶于200mMHCl)將得到較好的蛋白消化結(jié)果。
動物實驗,現(xiàn)在已經(jīng)成為現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)不可分割的一個組成部分,已形成一門獨立的綜合性基礎(chǔ)科學(xué)門類。這門科學(xué)的重要性在于,一方面它作為科學(xué)研究的重要手段,直接影響著許多領(lǐng)域研究課題成果的確立和水平的高低;另一方面,作為一門科學(xué),它的提高和發(fā)展,又會把許多領(lǐng)域課題的研究引入新的境地。因此,實驗動物科學(xué)技術(shù)的重要性可概括為下面三句話:它是現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的重要組成部分,是生命科學(xué)的基礎(chǔ)和條件,是衡量一個國家或一個科研單位科學(xué)研究水平的重要標志。