武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 檢測(cè)
湖北動(dòng)物全自動(dòng)血液分析-思特進(jìn)-動(dòng)物全自動(dòng)血液分析公司
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店鋪主推品 熱銷潛力款
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
店齡5年 企業(yè)認(rèn)證
聯(lián)系人
夏經(jīng)理
聯(lián)系電話
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)加工
所在地區(qū)
湖北省武漢市
主營(yíng)產(chǎn)品
樣品預(yù)處理
在待測(cè)樣品中,DNA或RNA通常都是被蛋白包裹纏繞,根據(jù)不同的細(xì)胞和組織樣品的應(yīng)用,可選擇合適的預(yù)處理方法將靶核酸暴露:
內(nèi)源性酶滅活:如果探針的檢測(cè)是通過酶促法進(jìn)行的,則樣品內(nèi)相應(yīng)的內(nèi)源性酶必須被滅活。如內(nèi)源性的POD可通過含1%H2O2的甲醛溶液處理30min。如果檢測(cè)酶為AP,可在底物溶液中加入左旋咪唑,AP檢測(cè)的內(nèi)源性背景一般來說比POD檢測(cè)的低得多,因?yàn)樵陔s交過程中,樣品中內(nèi)源性AP酶的活性基本都喪失了。
RNase處理:在DNA-DNA雜交實(shí)驗(yàn)中,RNase的處理可去除內(nèi)源性RNA,增加實(shí)驗(yàn)的信噪比。在進(jìn)行mRNA為靶標(biāo)的檢測(cè)時(shí),RNase處理的樣品也可作為質(zhì)控對(duì)照。通常的處理方式是將DNase-free的RNase溶解于2×SSC(100μg/ml),樣品在溶液中37℃處理60min。
肝纖維化動(dòng)物模型
模型概述:
1. 任何可引起肝損傷的因素長(zhǎng)期、反復(fù)作用于,均可產(chǎn)生肝細(xì)胞變性、壞死,繼而肝和纖維組織,導(dǎo)致肝纖維化。
2. 已有化學(xué)性損傷、性、生物學(xué)、酒精性和營(yíng)養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同,給藥途徑不同,產(chǎn)生的機(jī)理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復(fù)性及機(jī)體自然患病過程相似程度等都不盡相同。
肝纖維化動(dòng)物模型造模方法:
1.法:
性肝纖維化產(chǎn)生的機(jī)理是Ⅲ型反應(yīng)引起,白蛋白和的大分子物質(zhì),作為異種抗原進(jìn)入大鼠體內(nèi)后,刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的,當(dāng)抗原再次進(jìn)人機(jī)體后抗原結(jié)合,形成抗原—復(fù)合物(IC),抗原的反復(fù)、長(zhǎng)期刺激,過量的復(fù)合物來不及被清除,沉積于的血管壁內(nèi)外,引起血管炎,造成肝損傷。反復(fù)導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死,再生,纖維等變化,后發(fā)展為肝纖維化、。
動(dòng)物選用雄性Wistar大鼠,體重130g左右。取豬0.5ml,腹腔內(nèi)注射,每周2次,共8次(豬的制備:取新鮮豬血,離心制,濾過,分裝放低溫冰箱備用)。
評(píng)價(jià):
大鼠第3周出現(xiàn)肝細(xì)胞變性、壞死,第4周的膠原纖維形成纖維束,從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延,發(fā)生纖維化。