武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 檢測(cè)
動(dòng)物全自動(dòng)生化檢測(cè)-動(dòng)物全自動(dòng)生化檢測(cè)公司-思特進(jìn)
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祺祴祹祹祶祲祵祻祲祸祸
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夏經(jīng)理
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)加工
所在地區(qū)
湖北省武漢市
主營(yíng)產(chǎn)品
SSC=150mMNaCl,15mM檸檬酸鈉溶液(pH7.4)
HCl處理:對(duì)樣本進(jìn)行20-30min的200mMHCl處理,可將蛋白抽提,并將核酸序列進(jìn)行一定程度的水解,增加雜交檢測(cè)的信噪比。
去垢劑處理:如果對(duì)樣品的固定、脫水、包埋等預(yù)處理過(guò)程不足以將脂膜成分破壞暴露核酸,可對(duì)樣品進(jìn)行額外的蛋白去垢劑處理(如TritonX-100和SDS)。
蛋白酶處理:樣品中待雜交的核酸序列常與蛋白纏繞交聯(lián)在一起,樣品的固定步驟更是加劇了蛋白的交聯(lián)程度,因此預(yù)滲透是核酸雜交前的常規(guī)步驟,通常通過(guò)蛋白酶K的消化作用來(lái)完成。根據(jù)不同的文獻(xiàn)來(lái)源,蛋白酶K的工作濃度通常設(shè)為10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMCaCl2,pH7.4,酶濃度可根據(jù)具體樣品進(jìn)一步優(yōu)化),對(duì)樣品進(jìn)行37°C7.5–30min的處理。染色體涂片或核片的蛋白酶K處理濃度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文獻(xiàn)指出,固定石蠟包埋的組織切片樣品,使用胃蛋白酶(500μg/ml,溶于200mMHCl)將得到較好的蛋白消化結(jié)果。
肝纖維化動(dòng)物模型
模型概述:
1. 任何可引起肝損傷的因素長(zhǎng)期、反復(fù)作用于,均可產(chǎn)生肝細(xì)胞變性、壞死,繼而肝和纖維組織,導(dǎo)致肝纖維化。
2. 已有化學(xué)性損傷、性、生物學(xué)、酒精性和營(yíng)養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同,給藥途徑不同,產(chǎn)生的機(jī)理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復(fù)性及機(jī)體自然患病過(guò)程相似程度等都不盡相同。