【醫(yī)療器械注冊證書編號】

國械注進20163402609

CA72-4(癌抗原72-4)最初被描述為由B72.3識別的抗原因子。B72.3是由相應的原發(fā)腫.瘤轉移后的膜萃取物免疫雜交生產的鼠單克隆抗體。CA72-4被證實是1MDa的粘液樣糖蛋白，合成物稱為TAG72（腫.瘤相關抗原72）。TAG72蛋白的分子量為48KD. 血清和血漿中的CA72-4的水平升高見于某些惡性疾病，包括胰、胃、膽、結.腸、乳腺、卵巢、子宮頸、子宮內膜的腫.瘤。它對胃腸道和卵巢的腫.瘤有很高的診斷學的敏感性。盡管在一些良性的疾病如風.濕.病和卵巢囊.腫也發(fā)現有CA72-4的升高，但是臨床研究表明，對于胃腸道和卵巢腫.瘤，特異性診斷高達95％。CA72-4的水平和腫.瘤的大小及分級緊密關聯。CA72-4是胃腸道腫.瘤的患者選擇 學的監(jiān)測和隨后的護理的指標。另外合適的指標是CA199和CEA，另外，CA72-4是卵巢腫.瘤的患者選擇 學的監(jiān)測和隨后的護理的可靠性指標，尤其是對于CA125陰性的患者。

【檢測原理】

DRG公司的TM-CA 72-4酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗（ELISA）。反應板上的微檢測孔包被有能結合CA72-4分子上獨特抗原位點的單克隆小鼠抗體。一份含有內源性CA72-4的患者樣本在包被孔中與酶聯物進行孵育，該酶聯物是一種聯結有辣根過氧化物酶的抗CA72-4抗體。孵育后，用洗滌液洗去未結合的酶聯物。結合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中CA72-4的濃度成正相關。加入底物溶液后，顯出的顏色強度與患者樣品中CA72-4的濃度成正比。

【主要組成成分】

1） 微孔板： 12×8孔，可拆，微孔中包被抗CA72-4 單克隆抗體。

2） 標準品（0-4）：5支 0.5ml，即用型，濃度為0，3，20，50，100U/ml，內含無水銀防腐劑。

3） 高低質控： 2支 凍干粉，0.5ml，質控品的濃度及范圍請見試劑瓶標簽或質控單。內含無水銀防腐劑。

4） 樣品稀釋液： 1支，3ml，即用型，內含無水銀防腐劑。

5） 酶聯物： 1支 1.4ml，10倍濃縮，標記辣根過氧化物酶的抗CA72-4抗體，內含無汞防腐劑。

6） 酶聯物稀釋液：1支，14ml，即用型型，含無汞防腐劑。

7） 底物液： 1支，14ml，即用型。

8） 終止液： 1支，14ml，即用型，含0.5M的硫酸，避免接觸終止液，以免刺激或著燒皮膚。

9） 洗滌液（40X）：1支，30ml。

注意：用于樣品稀釋的樣品稀釋液應視需要而定。

實驗需要器材（但試.劑盒不提供）

1) 酶標儀(450±10nm)。

2) 移液器

3) 吸水紙

4) 蒸餾水

5) 計時器

6) 坐標紙或是數據處理軟件

檢測步驟

每次實驗都應含有一條標準曲線。

1） 將實驗所需數目的板條固定在板架上。

2） 用一次性吸嘴將20μL的標準品﹑質控品和樣品加入相應的檢測孔中。

3） 每孔加入100μL的新鮮配制的酶聯物。 混合十秒，在此步驟里，充分搖勻十分重要。

4） 在室溫下溫育120分鐘。

5） 快速棄去檢測孔中的內含物，每孔用400μL洗滌液洗板五次，在吸水紙上用力拍板以除去殘留的液體。注意：洗板步驟是否正確將直接影響到實驗的靈敏度和 性。

6） 每孔加入100μL的底物液。

7） 在室溫下溫育30分鐘。

8） 每孔加入100μL的終止液終止反應。

9） 在加終止液后十分鐘內，室溫下，于450±10nm處讀取吸光率。

【結果計算】

1） 計算標準品﹑質控品和患者樣品的平均吸光率。

2） 以吸光率為Y軸，濃度為X軸，按照從標準品中獲得的平均吸光率和其相對應的濃度值，繪制標準曲線。

3） 利用樣品的平均吸光率，在標準曲線上得出其相應的濃度值。

4） 自動方法：使用立方函數﹑四參數模式或雙對數的計算機程序可得到結果。

5） 樣品的濃度可從標準曲線上直接獲取。樣品的濃度高于最.高標準品的濃度則需進一步稀釋。在計算樣品的濃度的時候，要乘以稀釋倍數。

下面是CA72-4 ELISA的標準曲線的典型例子。

標準品	吸光率（450nm）
零標準品（0 U/ml）	0.08
標準品1（3 U/ml）	0.19
標準品2（20 U/ml）	0.59
標準品3（50 U/ml）	1.16
標準品4（100 U/ml）	2.02

【期望值】

每個實驗室必須建立自己的正常值。

以下是利用DRG公司的糖類抗原72-4（CA72-4）測定試.劑盒（酶聯免疫法）EIA-5071對正常成年人測試所得到的結果：

測試人群	有效例數	中間值	平均值	5th-95th
健康人群	89	2.0 U/mL	2.3 U/mL	0 U/mL-6.5 U/mL

【注意事項】

1） 在使用前所有試劑和樣品均需平衡至室溫，所有試.劑要充分混合但不要起泡。

2） 一旦實驗開始，所有步驟都必須進行到底而不能中斷。

3） 對每種試.劑﹑標準品和樣品使用一次性的吸嘴，以避免交叉污染。

4） 吸光率決定于溫育時間和溫度，在開始實驗前，建議準備好所有的試劑，將需要檢測的微孔板固定在板架上，這些步驟保證每次加液步驟所需時間相同而沒有中斷。

5） 按照一般的規(guī)律，酶反應時間與溫育時間和溫度成線性比例。

【生產企業(yè)】

德國 DRG Instruments GmbH

【國內售后單位】

深圳市科潤達生物工程有限公司

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聯系電話：0755-26814430