普利萊 無(wú)酶細(xì)胞消化液 貨號(hào)：C1000-5L

描述：無(wú)酶細(xì)胞消化液不含蛋白消化酶，但能有效地使貼壁細(xì)胞與培養(yǎng)瓶皿表面脫離而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。與常規(guī)胰蛋白酶消化方法相比，無(wú)酶細(xì)胞消化液作用溫和，不損傷和破壞細(xì)胞，不影響細(xì)胞生物學(xué)特性，是腫瘤細(xì)胞在體移植實(shí)驗(yàn)的最佳細(xì)胞脫壁方法。細(xì)胞用無(wú)酶消化液脫壁后，可直接進(jìn)行傳代培養(yǎng)或離心收集用于其它實(shí)驗(yàn)。由于未使用蛋白酶制劑，因此特別適于收集細(xì)胞進(jìn)行核 蛋白和胞漿蛋白制備、Western Blot、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)，同時(shí)能夠避免樣品蛋白降解，并避免蛋白酶制劑中的RNA 酶對(duì)RNA 的降解。

特點(diǎn)：

1.         室溫孵育10 分鐘，貼壁細(xì)胞即可從瓶皿脫落，溫和而有效

2.         脫壁的細(xì)胞可用于連續(xù)傳代

3.         培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行在體移植實(shí)驗(yàn)的最佳消化方法

4.         避免蛋白酶過(guò)度消化細(xì)胞及降解樣品蛋白

5.         制備胞核和胞漿蛋白、進(jìn)行Western Blot、免疫共沉淀

6.         避免蛋白酶制劑中污染的RNA 酶降解RNA

規(guī)格：5L

儲(chǔ)存：4°C 密封1年有效

操作步驟：

1.       用PBS洗滌單層培養(yǎng)細(xì)胞，盡可能完全去除瓶中液體。

2.       加入適量無(wú)酶細(xì)胞消化液使其覆蓋細(xì)胞表面，晃動(dòng)瓶皿，使所有細(xì)胞均充分接觸無(wú)酶消化液。

3.       室溫放置10分鐘或適宜時(shí)間，偶爾晃動(dòng)瓶皿，直到細(xì)胞完全脫壁?？杉尤爰?xì)胞培養(yǎng)基或2-3倍體積PBS緩沖液終止反應(yīng)。脫壁后可能有成片細(xì)胞連在一起的現(xiàn)象，屬于正常，如用作腫瘤移植，上述情況的產(chǎn)生可利于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。37^oC時(shí)脫壁反應(yīng)會(huì)加速。

4.       500 g 離心5-10分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。

5.       收集的細(xì)胞可用于：(1) 胞核胞漿蛋白制備；(2) Western blot；(3) 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)；(4) DNA-蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)；(5) RNA提??；(6) 分瓶傳代。