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肺缺血再灌注損傷是由于機體組織或在缺血再灌注后導(dǎo)致肺組織迅速損傷。缺血再灌注可能發(fā)生在肺，也可能是下肢或腹主動脈等，導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞和肺毛細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞受損。

究其原因可能與組織細(xì)胞聚集、氧自由基產(chǎn)生和促炎因子釋放等病理生理反應(yīng)有關(guān)。

結(jié)扎法制備肺缺血再灌注損傷模型常用，因其操作簡單、成功率高、實用性強，是研究肺缺血再灌注損傷發(fā)病機制和防治保護的關(guān)鍵。

制備肺缺血再灌注模型我們選用適齡的SD大鼠，通過結(jié)扎手術(shù)進行造模。

原位雜交過程

雜交前可進行預(yù)雜交，以防止較高的背景染色。預(yù)雜交條件與雜交條件相同，只是預(yù)雜交液中不含探針和硫酸葡聚糖。

靶DNA的變性（對mRNA的原位雜交無需此步）

樣品DNA的變性在DNA-DNA雜交檢測中是必須的步驟，但同時可能會造成樣品形態(tài)學(xué)的部分破壞，此步是實驗中需要優(yōu)化的一個步驟。常用的變性方法為堿變性和熱變性，實驗時可以摸索變性時間、變性溫度等參數(shù)以獲得佳條件。

如使用熱變性方法，可在雜交時將探針的變性和樣品DNA變性同步進行：將樣品和探針溶液加蓋蓋玻片，置于烘箱80℃變性，染色體DNA樣品處理2min，后冷卻至37℃進行雜交。組織樣品DNA的變性時間可增加至80℃10min。

動物實驗檢測原理：

動物模型是在生物醫(yī)學(xué)研究過程中所建立的具有人類疾病性模擬性表現(xiàn)的動物疾病材料，這種方法是促進生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展的一種重要的途徑，無論在疾病的發(fā)生和發(fā)展過程中，都起到了至關(guān)重要的作用。其中，模型是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中為常用的動物模型之一，它包括皮下模型、模型及原位模型等。

通過建立小鼠荷瘤數(shù)據(jù)模型，研所生長本質(zhì)機器發(fā)展規(guī)律，從而尋求對生長及轉(zhuǎn)移有抑制作用的及方法。