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磷酸果糖激酶（PFK）測試盒測定意義

測定意義

PFK（EC 2.7.1.11）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP，是糖酵解過程的關鍵調節(jié)酶之一。

測定原理

PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PFK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

提取液：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
操作步驟：
一、粗酶液提取：
1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待測。
2.細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.血清等液體：直接測定。
二、測定操作： 
1.分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到412 nm，蒸餾水調零。 
2.試劑二置于37℃水浴中預熱30min。 
3.空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL蒸餾水、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，迅速混勻，于412nm處測定3min內吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2。△A空白管=A2－A1 
4.測定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，，迅速混勻，于412nm處測定3min內吸光值變化，第10s吸光值記為A3，第190s吸光值記為A4。△A測定管=A4-A3 

磷酸果糖激酶（PFK）測試盒產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：雙試劑，96孔板直接操作，快速、簡便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。
6、回收試驗： X =102.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。且特異性強，不受類SOD物質的干擾
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

磷酸果糖激酶（PFK）測試盒產(chǎn)品售后有保障、品質無憂    高保障    品質現(xiàn)貨

1.嚴格的質量控制：嚴格檢測每一批產(chǎn)品，確保產(chǎn)品穩(wěn)定性，靈敏度。
2.專業(yè)的產(chǎn)品包裝：適應產(chǎn)品特性的包裝，確保運輸?shù)陌踩院痛鎯Φ挠行?span lang="EN-US">
3.秉持“客戶購買我們的產(chǎn)品就是收獲一份價值，一份安心的信念，竭誠提供優(yōu)質產(chǎn)品，售后服務無優(yōu)