深圳康體生命科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 試劑
康體生命Anti-Rabbit-Nanobody-VHH-IP
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? 實(shí)驗(yàn)步驟: 1.細(xì)胞裂解物的預(yù)制備: 在裝有 500uL 預(yù)清洗的細(xì)胞裂解物的離心管中加入 5μg 的一抗,孵育 1 小時(shí)。12000g 離心 3min, 后把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。 2.平衡 beads
1) 渦旋 Anti-Rabbit Nanobody IP Agarose Beads, 吸取 50uL (包含混懸液)放在 1.5ml 離心管中 2) 加入提前預(yù)冷的 500uL Dilution buffer(也可用 1xPBST(0.05%Tween-20)替代) 3) 4℃、1200G 離心 3 分鐘,去掉上清,重復(fù) 2 次 3.結(jié)合蛋白 將第一步獲得的細(xì)胞裂解物加入平衡好的 50 μL Anti-Rabbit Nanobody IP Beads,在搖床上孵育 1-3 小時(shí)。將離心管以 1200g 離心 3 分鐘。完全去除上清液。并用 500uL Dilution buffer(也可用 1ml 1xPBST 代替)重懸,洗滌 3-5 次。 3. SDS-PAGE 樣品制備: 最后一次洗滌并吸出上清液后,加入 30ul 1XSDS loading buffer 重懸。渦旋混勻后 95°C 中加 熱 10 min,1200g 離心 3min,收集上清液(避免攪動(dòng) Anti-Rabbit IP Beads), 跑 SDS-PAGE 凝 膠電泳。 ? 背景: ? Anti- Rabbit Nanobody IP Agarose Beads 是羊駝納米抗體(抗兔 IgG)偶聯(lián)的瓊脂糖珠懸浮 液。適用于所有一抗為兔抗體的免疫沉淀反應(yīng)。 ? 微珠儲(chǔ)存時(shí)會(huì)沉于底部,初次使用之前,輕柔混勻本產(chǎn)品(勿渦旋),以確保瓊脂糖珠均勻混懸 于保存液中。 ? 產(chǎn)品使用實(shí)例圖:
M I FT W E Immunoprecipitation of rabbit serum:Marker(M);Input(I);Flow through(FT); Wash(W);Elution(E).