?康體生命重組蛋白表達(dá)純化服務(wù)簡(jiǎn)介

         康體生命擁有頂級(jí)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和齊全蛋白純化設(shè)備，致力于打造國(guó)內(nèi)一流蛋白表達(dá)純化平臺(tái)，為科研機(jī)構(gòu)、高校、藥企等提供蛋白純化CRO服務(wù)。

服務(wù)內(nèi)容：

      康體生命提供重組蛋白表達(dá)與純化服務(wù)，現(xiàn)有的表達(dá)系統(tǒng)包括：E.coli 原核表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)

（畢赤酵母）、昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)（桿狀病毒）、哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，為客戶提供多樣化定制服務(wù)。

服務(wù)流程：

客戶填寫《康體生命蛋白純化服務(wù)需求登記表》康體生命原核蛋白表達(dá)純化服務(wù)需求登記表，與公司技術(shù)部商討具體的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、

生命進(jìn)行一站式表達(dá)純化服務(wù)；客戶提供含有目標(biāo)基因的載體，康體生命提供試表達(dá)及表

達(dá)優(yōu)化、純化等服務(wù)。

原核表達(dá)服務(wù)：

大腸桿菌E.coli的遺傳背景和生理特性非常清楚，是最常用的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)，原核表達(dá)系統(tǒng)具有繁殖快、培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單、目的基因表達(dá)水平高等多重優(yōu)勢(shì)。主要應(yīng)用有：制備抗原、蛋白酶活性檢測(cè)、蛋白互作（Co-IP、Pull-down等）、蛋白晶體研究、生化實(shí)驗(yàn)等，常用的載體有pET系列、pGEX，表達(dá)菌株有BL21、Rosetta等，最快3-4個(gè)周可交付目的蛋白。表達(dá)流程：

交付客戶：

項(xiàng)目完成后，交付客戶要求量純化蛋白（純度>90%，Tris/PBS或其他保存方式）、目標(biāo)質(zhì)粒及菌株、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（蛋白純度、濃度及其他相關(guān)項(xiàng)目報(bào)告），如需內(nèi)毒素控制，請(qǐng)?zhí)崆白稍儨贤ā?/span>

康體生命優(yōu)勢(shì)：

1 康體生命具有強(qiáng)大的技術(shù)實(shí)力，由長(zhǎng)江學(xué)者組建技術(shù)團(tuán)隊(duì)，并由4位在蛋白表達(dá)純化方面擁有6             年以上經(jīng)驗(yàn)的博士分別帶隊(duì)組建各個(gè)表達(dá)純化平臺(tái)，做到專人專項(xiàng)。

2 成熟的蛋白表達(dá)純化平臺(tái)，一站式服務(wù)，專業(yè)的事交給專業(yè)的我們來(lái)做，省時(shí)省力。

3 質(zhì)優(yōu)價(jià)廉，在獲得優(yōu)質(zhì)蛋白的同時(shí)客戶花費(fèi)遠(yuǎn)低于市場(chǎng)平均價(jià)。

4 康體生命蛋白表達(dá)純化平臺(tái)齊全，客戶可根據(jù)需求靈活選擇表達(dá)平臺(tái)，不走彎路。

常見問題：

A 客戶需提供什么信息？

客戶至少需提供蛋白序列信息，以及蛋白純化的要求，詳見客戶需求登記表康體生命原核蛋白表達(dá)純化服務(wù)需求登記表。

B 完成整個(gè)項(xiàng)目需要多少時(shí)間？

因不同蛋白特性差異很大，表達(dá)純化過(guò)程中存在不可預(yù)見性的狀況時(shí)有發(fā)生，我們只能根據(jù)常規(guī)理想條件預(yù)估項(xiàng)目時(shí)間，在項(xiàng)目執(zhí)行過(guò)程中我們會(huì)隨時(shí)與客戶保持溝通。

C 蛋白表達(dá)中的問題

        不同物種來(lái)源的蛋白適用的蛋白表達(dá)系統(tǒng)也不同，客戶根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的系，康體還提供真核表達(dá)系統(tǒng)純化服務(wù)。原核表達(dá)我們首選上清純化，如蛋白不可溶，推薦融合合適標(biāo)簽助溶；包涵體蛋白純化不提供復(fù)性服務(wù)。

D 關(guān)于收費(fèi)問題

        我們承諾蛋白純化不出來(lái)不收費(fèi)，詳情請(qǐng)與工作人員詳細(xì)了解。

哺乳類動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

表達(dá)流程：

哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)服務(wù)技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

· 高效表達(dá)載體
· 優(yōu)化篩選的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)
· 多年的蛋白真核表達(dá)經(jīng)驗(yàn)
· 高通量，大規(guī)模蛋白表達(dá)生產(chǎn)能力
· 從基因序列到純化后蛋白的一站式服務(wù)
· 表達(dá)水平高，能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊

昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

         

表達(dá)流程：

流程	內(nèi)容	周期	交付內(nèi)容	價(jià)格
表達(dá)體系選擇	表達(dá)載體：常規(guī)商業(yè)化載體，或客戶自己改造后的載體；表達(dá)細(xì)胞：sf9,sf21,High-5			詢價(jià)
表達(dá)載體構(gòu)建	基因優(yōu)化和設(shè)計(jì)，基因設(shè)計(jì)及克隆	2周	構(gòu)建好的載體、甘油菌、測(cè)序報(bào)告
小量表達(dá)及純化	轉(zhuǎn)化及bacmid鑒定，P1代桿狀病毒生產(chǎn)及表達(dá)測(cè)試（SDS-PAGE/WB）,最優(yōu)條件200 ml條件擴(kuò)大及純化	3-4周	可行性分析， SDS-PAGE or WB結(jié)果，實(shí)驗(yàn)報(bào)告
擴(kuò)大培養(yǎng)純化	蛋白親和純化（或其他純化方式），蛋白質(zhì)濃縮，SDS-PAGE/WB鑒定純化后的蛋白，MS鑒定	1-3周	毫克級(jí)純化蛋白、SDS-PAGE結(jié)果、色譜報(bào)告等

酵母表達(dá)系統(tǒng)

表達(dá)流程：

流程	內(nèi)容	周期	交付內(nèi)容	價(jià)格
密碼子優(yōu)化及全基因合成	密碼子優(yōu)化、全基因合成等	2-3周		詢價(jià)
載體構(gòu)建	根據(jù)蛋白及基因序列選擇合適載體，獲取目的片段并插入表達(dá)載體、質(zhì)粒測(cè)序等		構(gòu)建好的載體、甘油菌、測(cè)序報(bào)告
載體轉(zhuǎn)化、試表達(dá)	質(zhì)粒線性化，選取合適的表達(dá)菌株轉(zhuǎn)化（X33、GS115等），陽(yáng)性克隆篩選，小量表達(dá)實(shí)驗(yàn)，分析評(píng)估蛋白表達(dá)情況	2-3周	可行性分析，實(shí)驗(yàn)報(bào)告，根據(jù)蛋白表達(dá)情況提供一定量蛋白給客戶（可選）
1L菌液放大純化	挑選高表達(dá)菌株擴(kuò)大培養(yǎng)、大量表達(dá)純化，最后獲得純度>90%的目的蛋白，SDS-PAGE檢測(cè)等	2-3周	純化蛋白、SDS-PAGE報(bào)告、分子篩報(bào)告等

E.coli 原核表達(dá)系統(tǒng)

原核表達(dá)服務(wù)：

大腸桿菌E.coli的遺傳背景和生理特性非常清楚，是最常用的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)，原核表達(dá)系統(tǒng)具有繁殖快、培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單、目的基因表達(dá)水平高等多重優(yōu)勢(shì)。主要應(yīng)用有：制備抗原、蛋白酶活性檢測(cè)、蛋白互作（Co-IP、Pull-down等）、蛋白晶體研究、生化實(shí)驗(yàn)等，常用的載體有pET系列、pGEX，表達(dá)菌株有BL21、Rosetta等，最快3-4個(gè)周可交付目的蛋白。表達(dá)流程：

流程	內(nèi)容	周期	交付內(nèi)容	價(jià)格
基因合成及密碼子優(yōu)化	密碼子優(yōu)化、全基因合成等	約2周		詢價(jià)
載體構(gòu)建	根據(jù)蛋白及基因序列選擇合適載體，獲取目的片段并插入表達(dá)載體、質(zhì)粒測(cè)序等		構(gòu)建好的載體、甘油菌、測(cè)序報(bào)告
載體轉(zhuǎn)化、試表達(dá)	選取合適表達(dá)菌株轉(zhuǎn)化，小量表達(dá)實(shí)驗(yàn)，分析評(píng)估蛋白表達(dá)情況，優(yōu)化表達(dá)條件	1-2周	可行性分析，實(shí)驗(yàn)報(bào)告，根據(jù)蛋白表達(dá)情況提供一定量蛋白給客戶（可選）
1L菌液大量純化	擴(kuò)大培養(yǎng)、大量表達(dá)純化，最后獲得純度>90%的目的蛋白，SDS-PAGE檢測(cè)等	1-2周	純化蛋白、SDS-PAGE報(bào)告、分子篩報(bào)告等