流·感 A檢測(cè)試劑ELISA
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流·感-A檢測(cè)試劑ELISA

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數(shù)量 変量
用途范圍 用于人血清和血漿中流 感A IgG的定性和定量檢測(cè)。
產(chǎn)地 德國(guó)
品牌 德國(guó)IBL
樣本 血清或血漿
檢測(cè)方法 酶聯(lián)免疫法
應(yīng)用 試劑盒可用于人血清和血漿中流 感A IgG的定性和定量檢測(cè)。
檢測(cè)限 僅供體外診斷使用
貨號(hào) RE56441
商品介紹

流 感A IgG檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:流 感A IgG檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱:Influenza A IgG ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】96T

【預(yù)期用途】

試劑盒可用于人血清和血漿中流 感A IgG的定性和定量檢測(cè)。

【前言簡(jiǎn)介】

流行性感 冒是呼 吸道的一種急性發(fā)熱病毒感染。這種感染大多由飛沫傳染所致,并成為一種流行病。這一病毒以及它的毒素可導(dǎo)致支氣 管黏膜出現(xiàn)嚴(yán)重的炎 癥,也可使支 氣 管受到損害。1到3天的潛伏期后,感染癥 狀就會(huì)突然出現(xiàn):之后會(huì)出現(xiàn)體溫急劇升高,常常還伴隨有顫 抖,出現(xiàn)鼻黏膜炎的主要癥 狀,還會(huì)出現(xiàn)令人疼 痛的干 咳,氣管 炎,喉 炎和常發(fā)性的鼻 炎與結(jié)膜 炎。流 感病毒可組成一主要形態(tài)學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)特性相似的病毒群體。我們將流 感病毒分A、B和C三大類,其中也包括很多其它的變種。根據(jù)其核蛋白和基質(zhì)蛋白的不同抗原性,我們可以區(qū)別流 感病毒的不同類型。但實(shí)際上起免疫作用的抗原是紅細(xì)胞凝集素和神經(jīng)氨酸苷酶。這兩種抗原都是表面抗原,都可表現(xiàn)為持久的抗原可變性,叫做轉(zhuǎn)換。因而會(huì)出現(xiàn)新的流行性感 冒,而且抗原的可變性可促進(jìn)它的流行性。流 感病毒類型(A、B和C)的確定給臨床醫(yī)生和流行病學(xué)家進(jìn)行進(jìn)一步診斷提供了重要指示。因而我們知道了流 感病毒B可導(dǎo)致嚴(yán)重的臨床病程,也可使其病毒流行擴(kuò)散。同樣的,在流 感病毒A的傳染中,流行病學(xué)的價(jià)值以及機(jī)體保護(hù)的檢測(cè)方法就變得很重要了。

【檢測(cè)原理】

此固相ELISA試劑盒利用的夾心法,包被板上包被了抗原。用對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗來檢測(cè)結(jié)合到包被抗原上的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后,所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得。

【主要組成成分】

4×2ml

標(biāo)準(zhǔn)品A-D

1;10;50;150U/mL,待用

標(biāo)準(zhǔn)品A=陰性質(zhì)控           標(biāo)準(zhǔn)品B=臨界質(zhì)控

標(biāo)準(zhǔn)品C=弱陽性質(zhì)控         標(biāo)準(zhǔn)品D=陽性質(zhì)控

內(nèi)含抗流 感A的IgG抗體,PBS(磷酸緩沖液),穩(wěn)定劑。

1×15ml

酶聯(lián)物

紅色,待用。內(nèi)含過氧酶標(biāo)記的抗人IgG,蛋白緩沖液,穩(wěn)定劑。

1×12×8

微孔板

可拆,包被有特異性抗原。

1×15ml

底物液

含TMB

1×15ml

終止液

0.5MH2SO4

1×60ml

稀釋液

含PBS緩沖液,BSA,<0.1%NaN3

1×60ml

濃縮洗滌液

濃縮型(10×),含PBS緩沖液,吐溫20

封板紙

用于在溫育時(shí)遮蓋微孔板

自封袋

用于儲(chǔ)存不用的板條

所需材料(未提供)

1) 移液器,體積:5;50;100;500 μL

2) 校準(zhǔn)儀

3) 樣品稀釋用試管(1ml)

4) 帶試劑儲(chǔ)器8道移液器

5) 洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)

6) 能在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀

7) 雙蒸水或去離子水

8) 吸水紙,取樣吸頭和計(jì)時(shí)器

【儲(chǔ)存條件】

試劑盒必須貯存于2-8℃的環(huán)境中,避免高溫或太陽直射。樣品和試劑的貯存和穩(wěn)定性將在相關(guān)章節(jié)闡述。開封包被板在有效期內(nèi)穩(wěn)定,但在2-8℃環(huán)境下貯存時(shí)請(qǐng)把包裝袋密封好。

【樣本要求】

血清,血漿(EDTA,肝素)

按照一般原則進(jìn)行靜 脈采血。自樣品采集到檢測(cè)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)完整性。不要使用易容血、黃 疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁,實(shí)驗(yàn)前應(yīng)將其離心以除去顆粒物質(zhì)。

貯存

2-8℃

≤-20℃

避免高溫和太陽直射,避免反復(fù)凍融

穩(wěn)定性

2天

>2天

【檢測(cè)方法】

成分準(zhǔn)備

稀釋/溶解

成分


稀釋液

比例

備注

貯存

穩(wěn)定性

20ml

洗滌液

200ml

雙蒸水

1:11

加熱至37°C以溶解結(jié)晶,充分混合

2-8°C


8周

樣品稀釋

樣品

稀釋

稀釋液

比例

備注

血清/血漿

常規(guī)方法

稀釋緩沖液

1:101

例:5μL+500μL稀釋緩沖液

樣品中IgG濃度高于*標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步稀釋。

檢測(cè)步驟

1) 加100μL標(biāo)準(zhǔn)品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中,在定性檢測(cè)中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。

2) 封板后室溫(18℃-25℃)溫育60分鐘。

3) 移去封板紙,棄去孔中液體。用300μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100μL酶聯(lián)物。

5) 封板后室溫(18℃-25℃)溫育30分鐘

6) 移去封板紙,棄去孔中液體。用300μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí),如果有條件的話,可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生

7) 每孔加TMB底物液100μL。

8) 室溫(18℃-25℃)避光溫育20分鐘。

9) 在每一微孔中加入100μLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)包被板以使試劑混合均勻。此時(shí),顏色藍(lán)色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值。

【結(jié)果計(jì)算】

質(zhì)量控制

嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟的實(shí)驗(yàn)結(jié)果才是有效的。使用者必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室優(yōu)化管理規(guī)定或其他的實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。按照質(zhì)控單的要求,所有的標(biāo)準(zhǔn)品濃度都必須在一個(gè)可以接受的范圍內(nèi)。如果其標(biāo)準(zhǔn)不符合要求,那么實(shí)驗(yàn)則無效,必須重做。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)使用已知濃度的樣品做進(jìn)一步的有效質(zhì)控。如果實(shí)驗(yàn)背離實(shí)際結(jié)果,應(yīng)檢查以下問題:試劑有效期,貯存條件,取樣器,實(shí)驗(yàn)設(shè)備,溫育時(shí)間,清洗方法。

定性評(píng)估

臨界值是直接從標(biāo)準(zhǔn)品B中得出。臨界指標(biāo)(COI)是由樣本的平均OD值和臨界質(zhì)控的平均OD值計(jì)算得出來的。如果樣本的平均OD值在臨界值±20%內(nèi),則該樣本應(yīng)判定為可疑樣本;OD值高于臨界值則為陽性,反之為陰性

定量評(píng)估

在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或自動(dòng)計(jì)算的方法,以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值(Y軸,線性)對(duì)其濃度(X軸,對(duì)數(shù))做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程可以得到更好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在推算標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),應(yīng)當(dāng)充分利用好每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值(明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當(dāng)被忽略,再使用更加合理的數(shù)值代替它)。樣品的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接讀取。從坐標(biāo)紙上讀取結(jié)果時(shí)應(yīng)當(dāng)把起始的稀釋倍數(shù)考慮進(jìn)去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應(yīng)的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于*標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)按實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明所述的方法進(jìn)行稀釋,并重新檢測(cè)。

結(jié)果判定

方法

U/ml

說明

定量

(標(biāo)準(zhǔn)曲線)

<8

陰性

8-12

灰區(qū)

聯(lián)系方式
公司名稱 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
聯(lián)系賣家 邱紀(jì)蘭 (QQ:3007975839)
電話 钺钵钼钼-钹钸钻钳钷钷钶钺
手機(jī) 钳钼钵钳钳钴钵钶钸钺钻
傳真 钺钵钼钼-钹钸钻钳钷钷钶钺
地址 廣東省深圳市
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