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北京普利萊基因技術(shù)有限公司 
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北京普利萊基因技術(shù)有限公司
店齡4年 · 
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北京市昌平區(qū)
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店齡4年 · 企業(yè)認(rèn)證 · 北京市昌平區(qū) 北京普利萊基因技術(shù)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 科研試劑, elisa試劑盒, 染色液, 抗體試劑, 免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù), 特殊染色服務(wù), 核酸檢測(cè)服務(wù), 生化測(cè)定服務(wù), ELISA試劑盒定制化服務(wù), 抗體定制化服務(wù), 緩沖液定制化服務(wù)
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普利萊-組織細(xì)胞天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷草轉(zhuǎn)氨酶）AST/GOT活性檢測(cè)試劑盒（賴(lài)氏法）貨號(hào)-E2024
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訂貨量(次)
￥450.00
≥105
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商品參數(shù)
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商品介紹
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聯(lián)系方式
品牌 普利萊
產(chǎn)品品牌 APPLYGEN
產(chǎn)品名稱(chēng) 普利萊 組織細(xì)胞天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷草轉(zhuǎn)氨酶）AST/GOT活性檢測(cè)試劑盒（賴(lài)氏法）
英文名稱(chēng) 無(wú)
貨號(hào) E2024
產(chǎn)品規(guī)格 105次
用途 科研實(shí)驗(yàn)專(zhuān)用
儲(chǔ)存 具體根據(jù)說(shuō)明書(shū)操作
儲(chǔ)存周期 根據(jù)說(shuō)明書(shū)具體操作
供貨能力 現(xiàn)貨
商品介紹
普利萊 組織細(xì)胞天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷草轉(zhuǎn)氨酶）AST/GOT活性檢測(cè)試劑盒（賴(lài)氏法） 貨號(hào): E2024
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
| E2024 | 組織細(xì)胞天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷草轉(zhuǎn)氨酶）AST/GOT活性檢測(cè)試劑盒（賴(lài)氏法） | 105次 | 450 |
描述：天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶又稱(chēng)谷草轉(zhuǎn)氨酶、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶，英文名稱(chēng) Aspartate transaminase（簡(jiǎn)稱(chēng)AST）; aspartate aminotransferase（簡(jiǎn)稱(chēng)：AspAT/ASAT/AAT）; serum glutamic oxaloacetic transaminase(簡(jiǎn)稱(chēng)SGOT或GOT) 。在機(jī)體中以心肌含量最為豐富，其他組織如：肝臟、肌肉、腎、肺也含有此酶。急性心肌梗塞、急性肺炎、極大手術(shù)后此酶的活性明顯升高。另外，在肝、腎、肺、心、胸膜等臟器發(fā)生炎性病變時(shí)都可見(jiàn)此酶活性中度或輕度的升高。試劑盒可以測(cè)定血清、血漿等樣本中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性。
原理： 試劑盒采用賴(lài)氏法進(jìn)行AST活性檢測(cè)。谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST/GOT）能催化天門(mén)冬氨酸和α-酮戊二酸生成草酰乙酸，草酰乙酸脫羧形成丙酮酸，其可與顯色劑（2，4-二硝基苯肼）作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性條件下呈棕紅色，顏色深淺可以反映酶活性高低。
適應(yīng)范圍： 本試劑盒可以檢測(cè)組織或培養(yǎng)細(xì)胞中的谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性。
組成： （105次）
組分 | 規(guī)格 | 保存條件 |
組織細(xì)胞裂解液 | 100ml | 4℃保存 |
丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.6ml | -20℃避光保存 |
底物緩沖液 | 6ml | 4℃避光保存 |
PB緩沖液 | 0.6ml | 4℃保存 |
顯色劑：2，4-二硝基苯肼溶液 | 6ml | 4℃避光保存 |
終止試劑 | 60ml | 常溫保存 |
儲(chǔ)存：以上組分按要求保存，6個(gè)月有效。
操作步驟：
一. 樣品準(zhǔn)備：
1、動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl，含有0.16mg/ml肝素鈉) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照100mg組織加入500ul-1000ul，4 ℃或冰浴預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液,使用玻璃勻漿器或電動(dòng)勻漿器等4 ℃或冰浴勻漿。隨后4 ℃ 12000rpm離心5min，取上清，部分進(jìn)行蛋白定量（普利萊BCA法蛋白定量試劑盒P1511）。
2、收集細(xì)胞，按照每107個(gè)細(xì)胞加入500ul-1000ul，4 ℃或冰浴預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液,使用玻璃勻漿器或電動(dòng)勻漿器等4 ℃或冰浴勻漿。隨后4 ℃ 12000rpm離心5min，取上清，部分進(jìn)行蛋白定量（普利萊BCA法蛋白定量試劑盒P1511）。
二.酶活力測(cè)定：
1. 丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液的配制：按下表用底物緩沖液和PB緩沖液將丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成0、1.1ug、2.2ug、3.3ug、4.4ug、5.5ug七個(gè)濃度，充分混勻。丙酮酸0濃度孔只加底物緩沖液和PB緩沖液，以此作為空白孔調(diào)零，按照下述操作步驟操作，而后在520nm處讀吸光度OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
使用分光光度計(jì)測(cè)定，丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液稀釋比例：
PB緩沖液（ul） | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
底物緩沖液（ul） | 50 | 45 | 40 | 35 | 30 | 25 |
丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品（ul） | 0 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 |
對(duì)應(yīng)丙酮酸微克數(shù) | 0 | 1.1 | 2.2 | 3.3 | 4.4 | 5.5 |
使用酶標(biāo)儀測(cè)定，丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液稀釋比例：
PB緩沖液（ul） | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 |
底物緩沖液（ul） | 20 | 18 | 16 | 14 | 12 | 10 |
丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品（ul） | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
對(duì)應(yīng)丙酮酸微克數(shù) | 0 | 0.44 | 0.88 | 1.32 | 1.76 | 2.2 |
2. AST活性測(cè)定：
參照下表使用分光光度計(jì)進(jìn)行操作。
| 丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液 | 樣本管 | 樣本對(duì)照管 | 空白管 |
樣本（ul） | -- | 10 | 10 | -- |
標(biāo)準(zhǔn)品工作液（ul） | 60 | -- | -- | -- |
蒸餾水（ul） | -- | -- | -- | 10 |
底物緩沖液（ul） | -- | 50 | --- | -- |
充分混勻，37℃，孵育30分鐘 | ||||
顯色劑；2,4-二硝基苯肼溶液（ul） | 50 | 50 | 50 | 50 |
底物緩沖液（ul） | -- | -- | 50 | 50 |
充分混勻，37℃，孵育20分鐘 | ||||
終止試劑（ul） | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混勻，室溫靜置10分鐘，于波長(zhǎng)520nm使用分光光度計(jì)測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)品和樣本管吸光度值,注意設(shè)置樣品空白管。
| ||||
使用酶標(biāo)儀測(cè)定反應(yīng)體系：
| 丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品工作液 | 樣本管 | 樣本對(duì)照管 | 空白管 |
樣本（ul） | -- | 4 | 4 | -- |
標(biāo)準(zhǔn)品工作液（ul） | 24 | -- | -- | -- |
蒸餾水（ul） | -- | -- | -- | 4 |
底物緩沖液（ul） | -- | 20 | --- | -- |
充分混勻，37℃，孵育30分鐘 | ||||
顯色劑；2,4-二硝基苯肼溶液（ul） | 20 | 20 | 20 | 20 |
底物緩沖液（ul） | -- | -- | 20 | 20 |
充分混勻，37℃，孵育20分鐘 | ||||
終止試劑（ul） | 200 | 200 | 200 | 200 |
充分混勻，室溫靜置10分鐘，于波長(zhǎng)520nm酶標(biāo)儀測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)品和樣本管吸光度值,注意設(shè)置樣品空白管。
| ||||
三、AST酶活力計(jì)算：
以丙酮酸微克數(shù)為x軸，測(cè)得的吸光度OD值為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本對(duì)應(yīng)的丙酮酸質(zhì)量，然后根據(jù)AST酶活力單位計(jì)算公式，計(jì)算AST酶活性，建議以蛋白濃度進(jìn)行校正。
酶標(biāo)儀測(cè)定，AST酶活力：
未稀釋樣本AST酶活力 =（樣本管丙酮酸微克數(shù)-樣本對(duì)照管丙酮酸微克數(shù)）×250/2.5
稀釋樣本AST酶活力=（樣本管丙酮酸微克數(shù)-樣本對(duì)照管丙酮酸微克數(shù)）×稀釋倍數(shù)×250/2.5
分光光度計(jì)測(cè)定時(shí)，AST酶活力：
未稀釋樣本AST酶活力 =（樣本管丙酮酸微克數(shù)-樣本對(duì)照管丙酮酸微克數(shù)）×100/2.5
稀釋樣本AST酶活力=（樣本管丙酮酸微克數(shù)-樣本對(duì)照管丙酮酸微克數(shù)）×稀釋倍數(shù)×100/2.5
AST酶活力單位定義：每毫升樣本在37℃與底物作用30min后，能產(chǎn)生2.5ug的丙酮酸為一個(gè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力單位。
說(shuō)明：
1、谷草轉(zhuǎn)氨酶的正常參考值為0～50U。
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上數(shù)值在20～100U是準(zhǔn)確可靠的，超過(guò)200 U 時(shí)，需將樣品稀釋。
3、溶血標(biāo)本不宜使用，因血細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶活力較高，會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。
聯(lián)系方式
公司名稱(chēng) 北京普利萊基因技術(shù)有限公司
聯(lián)系賣(mài)家 劉總 
（QQ：584291973）
（QQ：584291973） 電話(huà) ῧῡῧ-ῠῧῦῢῡῢῧῢ
手機(jī) ῡ῟ῤῤῨῨῤῧῧῦῡ
傳真 ῧῡῧῠῨῧῤ῟ῡῢῠ
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