普利萊 組織細(xì)胞丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒 貨號(hào): E2019
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普利萊 組織細(xì)胞丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒 貨號(hào): E2019
普利萊 組織細(xì)胞丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒 貨號(hào): E2019
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普利萊 組織細(xì)胞丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒 貨號(hào): E2019

普利萊-組織細(xì)胞丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒-貨號(hào)-E2019

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品牌 普利萊
產(chǎn)品品牌 APPLYGEN
產(chǎn)品名稱 普利萊 組織細(xì)胞丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒
英文名稱 無
貨號(hào) E2019
產(chǎn)品規(guī)格 100次
用途 科研實(shí)驗(yàn)專用
儲(chǔ)存 具體根據(jù)說明書操作
儲(chǔ)存周期 根據(jù)說明書具體操作
供貨能力 現(xiàn)貨
商品介紹
普利萊 組織細(xì)胞丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒 貨號(hào): E2019

貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格價(jià)格（元）
E2019組織細(xì)胞丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100次330

描述：組織細(xì)胞丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒是一種靈敏簡(jiǎn)單的檢測(cè)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的試劑盒。丙二醛（Malondialdehyde, MDA）是一種生物體脂質(zhì)氧化的天然產(chǎn)物，一些脂肪酸氧化后逐漸分解為一系列包括MDA在內(nèi)的復(fù)雜化合物，通過檢測(cè)MDA的水平可評(píng)價(jià)脂質(zhì)氧化的水平，因此MDA的測(cè)定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標(biāo)。

本試劑盒是一種基于MDA和硫代巴比 妥酸（thiobarbituric acid, TBA）在較高溫度和酸性環(huán)境中反應(yīng)生成紅色MDA-TBA加和物，MDA-TBA加和物在535nm波長具有最大吸收，據(jù)此可以通過比色法進(jìn)行檢測(cè)。另外MDA-TBA受535nm波長激發(fā)光激發(fā)，在553nm波長發(fā)出熒光，因此，可以通過熒光法檢測(cè)MDA濃度。熒光法相對(duì)比色法靈敏度提高一個(gè)數(shù)量級(jí)。

規(guī)格：100次

儲(chǔ)存：按說明書要求儲(chǔ)存，12個(gè)月有效    

操作步驟：

1. 樣品的準(zhǔn)備

1.1 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集約2×106～2×107個(gè)新鮮細(xì)胞，PBS洗滌細(xì)胞一次，離心收集細(xì)胞，吸盡上清加入300 μl的組織細(xì)胞裂解液（提前加入100×的抗氧化劑BHT）冰浴裂解30分鐘。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于MDA定量測(cè)定。不立即測(cè)定的樣品可以-70℃保存。對(duì)于細(xì)胞量差別大的樣本請(qǐng)利用BCA蛋白定量法測(cè)定細(xì)胞裂解液上清中總蛋白濃度，以校正MDA測(cè)定結(jié)果。

1.2 組織樣品的準(zhǔn)備：利用含1mM EDTA的PBS灌流或漂洗組織，去除組織中的血液，然后取約10 mg組織，加入500 μl的組織細(xì)胞裂解液（提前加入100×的抗氧化劑BHT），冰浴勻漿。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于MDA定量測(cè)定。不立即測(cè)定的樣品可以-70℃保存。另外請(qǐng)利用BCA蛋白定量法測(cè)定組織裂解液上清中總蛋白濃度，以校正MDA測(cè)定結(jié)果。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備

2.1 TBA溶液的配制：將本試劑盒提供的1管50 mg TBA倒入50 ml離心管中，再加入7.5 ml TBA配置震蕩2分鐘溶解TBA，然后加入17.5 ml的純水，徹底溶解TBA，可以超聲助溶，即為TBA溶液，濃度為2 mg/ml。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

比色法標(biāo)準(zhǔn)品的配制：在1.5 ml離心管中，加入950 μl純水，再取50 μl的1 mM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品加入離心管中配制50 μM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品；然后取另外5根1.5 ml離心管，分別加入500 μl純水，再吸取500 μl的 50 μM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品依次倍倍稀釋為25、12.5、6.25、3.12、1.56 μM濃度。

熒光法標(biāo)準(zhǔn)品的配制：在1.5 ml離心管中，加入1 ml純水，再取5 μl的1 mM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品加入離心管中配制5 μM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品；然后取另外5根1.5 ml離心管，分別加入500 μl純水，再將500 μl的5 μM濃度MDA標(biāo)準(zhǔn)品依次倍倍稀釋為2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 μM濃度。

測(cè)定方法

1.       在1.5 ml離心管中，進(jìn)行配制反應(yīng)溶液一般情況下,對(duì)照管每批只需做1-2支，若樣本不存在溶血、脂血現(xiàn)象，對(duì)照管可以不做。

2.       將離心管置于95℃水浴或金屬浴反應(yīng)30分鐘，然后冰浴冷卻至室溫。

3.       10000g離心10min，取200 μl上清溶液，測(cè)定吸光度（535nm）或發(fā)射的熒光強(qiáng)度（ex535nm-em553nm）。

數(shù)據(jù)處理

利用MDA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值或發(fā)射熒光值為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，并獲得橫縱坐標(biāo)之間的函數(shù)關(guān)系式，然后利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和各樣品的吸光度值或發(fā)射熒光值計(jì)算樣品的MDA濃度。細(xì)胞裂解上清和組織勻漿上清，可以計(jì)算每毫克蛋白中的MDA量。

 

參考文獻(xiàn)

1. Armstrong, D., and Browne, R. (1994). Free Radicals in Diagnostic Medicine. 366: 43-58.

2. Armstrong, D., et al. (1998). Free Radicals and Antioxidant Protocols. 108:315-324.

3. Yagi, K. (1998). Free Radicals and Antioxidant Protocols. 108: 101-106.

 

 

 

注意事項(xiàng)

1. 血紅蛋白對(duì)測(cè)定有一定干擾，請(qǐng)盡量避免血漿和血清制備過程中的溶血。

2. TBA配制成溶液后不夠穩(wěn)定，要在4℃避光儲(chǔ)存，一周內(nèi)用完。

3. 初次使用試劑盒時(shí)，粉末試劑和小體積液體試劑請(qǐng)適當(dāng)離心后使用。

4. 本產(chǎn)品僅限專業(yè)人員用于科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。






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公司名稱 北京普利萊基因技術(shù)有限公司
聯(lián)系賣家 劉總 （QQ：584291973）
電話 재잵재-잴재잳잲잵잲재잲
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