描述：液體樣本丙二醛（MDA）檢測試劑盒是一種靈敏簡單的檢測脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的試劑盒。丙二醛（Malondialdehyde, MDA）是一種生物體脂質(zhì)氧化的天然產(chǎn)物，一些脂肪酸氧化后逐漸分解為一系列包括MDA在內(nèi)的復雜化合物，通過檢測MDA的水平可評價脂質(zhì)氧化的水平，因此MDA的測定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標。

本試劑盒是一種基于MDA和硫代巴比 妥酸（thiobarbituric acid, TBA）在較高溫度和酸性環(huán)境中反應生成紅色MDA-TBA加和物，MDA-TBA加和物在535nm波長具有最大吸收，據(jù)此可以通過比色法進行檢測。另外MDA-TBA受535nm波長激發(fā)光激發(fā)，在553nm波長發(fā)出熒光，因此，可以通過熒光法檢測MDA濃度。熒光法相對比色法靈敏度提高一個數(shù)量級。

規(guī)格：100次

儲存：按說明書要求儲存，12個月有效    

操作步驟：

操作步驟：

1. 樣品的準備

血漿樣品的準備：取新鮮抗凝血液，4℃，1000g離心10分鐘，上清為血漿。取上清用于MDA的測定不立即測定的樣品可以-70℃保存。

血清樣品的準備：取新鮮血液，室溫凝固30min，2000g離心10分鐘，上清為血清。取上清用于MDA測定。不立即測定的樣品可以-70℃保存。

尿液樣品的準備：取新鮮尿液，4℃靜置30min去除不溶物，取上清用于MDA的測定。不立即測定的樣可以-70℃保存。

2. 試劑盒的準備

2.1 TBA溶液的配制：將本試劑盒提供的1管50 mg TBA倒入50 ml離心管中，再加入7.5 ml TBA配置震蕩2分鐘溶解TBA，然后加入17.5 ml的純水，徹底溶解TBA，可以超聲助溶，即為TBA溶液，濃度為2 mg/ml。

3. 標準品的準備

比色法標準品的配制：在1.5 ml離心管中，加入950 μl純水，再取50 μl的1 mM濃度MDA標準品加入離心管中配制50 μM濃度MDA標準品；然后取另外5根1.5 ml離心管，分別加入500 μl純水，再吸取500 μl的 50 μM濃度MDA標準品依次倍倍稀釋為25、12.5、6.25、3.12、1.56 μM濃度。

熒光法標準品的配制：在1.5 ml離心管中，加入1 ml純水，再取5 μl的1 mM濃度MDA標準品加入離心管中配制5 μM濃度MDA標準品；然后取另外5根1.5 ml離心管，分別加入500 μl純水，再將500 μl的5 μM濃度MDA標準品依次倍倍稀釋為2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 μM濃度。

測定方法

1.         在1.5 ml離心管中，進行配制反應溶液一般情況下,對照管每批只需做1-2支，若樣本不存在溶血、脂血現(xiàn)象，對照管可以不做。

2.         將離心管置于95℃水浴或金屬浴反應30分鐘，然后冰浴冷卻至室溫。

3.         10000g離心10min，取200 μl上清溶液，測定吸光度（535nm）或發(fā)射的熒光強度（ex535nm-em553nm）。

數(shù)據(jù)處理

利用MDA標準品濃度為橫坐標，吸光度值或發(fā)射熒光值為縱坐標制作標準曲線，并獲得橫縱坐標之間的函數(shù)關系式，然后利用標準曲線和各樣品的吸光度值或發(fā)射熒光值計算樣品的MDA濃度。