描述：膜立染(立春紅替代品)不含有毒化學(xué)品，可對PVDF和NC膜以及聚丙烯酰胺凝膠蛋白進(jìn)行快速染色。靈敏度極高，可檢測10 ng蛋白條帶，而麗春紅膜染色靈敏度為1000 ng，蘇丹黑為500 ng。本產(chǎn)品不使用醋酸和甲醇等有毒物質(zhì)，染色劑可直接溶于水。膜染色20秒即可完畢，條帶清晰為紫褐色，背景染色極低。新鮮或陳舊的干燥膜均可染色。染色條帶清晰不退色，可直接掃描或照相。染色完全可逆，染過的膜在含0.05% Tween 20的封閉液封閉即可脫色，也可在堿性條件下數(shù)秒內(nèi)完全脫色。不影響后續(xù)Western Blot。適用于硝酸纖維素膜、PVDF膜、尼龍膜。用于監(jiān)測蛋白轉(zhuǎn)膜，膜染色蛋白條帶可用做Western Blot內(nèi)對照?？梢苑磸?fù)使用2-4次。

適用： 直接用于硝酸纖維素膜和PVDF膜快速染色。監(jiān)測轉(zhuǎn)膜、染色蛋白條帶，用做Western Blot內(nèi)對照。

儲(chǔ)存： 室溫保存 12個(gè)月有效

安全性：無特殊毒性，按一般化學(xué)品操作規(guī)程處理。

操作步驟：

PVDF/NC膜染色：

1. 將PVDF膜或NC膜完全浸入染色工作液，室溫20秒，膜上出現(xiàn)紫褐色蛋白條帶。若蛋白豐富則10秒鐘即可達(dá)到最佳對比度。沒有蛋白條帶表明膜上沒有蛋白。

2. 取出膜，掃描或照相。如果染色背景較深，可用蒸餾水清洗背景染色，直到出現(xiàn)滿意的對比度。在水中停留更長時(shí)間會(huì)緩慢洗去部分染色，但條帶仍清晰可見。脫色過度可以重新染色。染過色的膜可干燥保存。

3. 將染色膜直接放入含去垢劑的封閉緩沖液中封閉(150 mM NaCl, 20 mM Tris-Cl pH7.4, 5% defat milk, 0.05% Tween 20)。1小時(shí)后膜染色將完全褪去，不影響后續(xù)Western Blot操作。另外，將膜浸入0.05-0.1N NaOH水溶液中，數(shù)十秒內(nèi)即可完全清除膜染色，不影響后續(xù)Western Blot操作。

說明：

1. 如果是干燥的PVDF膜，染色前應(yīng)該先用甲醇或乙醇浸泡濕潤，然后用水沖洗。

2. 膜染色可在蛋白轉(zhuǎn)移之后立即進(jìn)行，或在完成Western Blot后進(jìn)行。

3. 正如可用DNA或RNA瓊脂糖凝膠電泳條帶照相判斷Southern或Northern Blot加樣量一樣，膜染色條帶極其清晰并與條帶蛋白含量成正比，因而可用做Western Blot的內(nèi)對照。

4. 膜染色染色之后，染色液可以回收，裝入新容器內(nèi)，室溫或4 oC保存，可反復(fù)使用2-4次。