核糖體（ribosome）RNA解離試劑盒產(chǎn)品說明書

圖片僅供參考，以實物為準(zhǔn)

主要用途

核糖體（ribosome）RNA解離試劑是一種旨在通過化學(xué)方法，解離核糖體RNA分子，充分滅活RNA酶，以及有機(jī)溶劑有效萃取的技術(shù)處理，以獲得不含蛋白質(zhì)的純度最佳的核糖體RNA的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織樣品（人體、動物、植物等）的核糖體RNA提取。產(chǎn)物可以直接用于Northern雜交、斑點(diǎn)雜交、體外翻譯、RT-PCR、構(gòu)建cDNA文庫等各種后續(xù)分子生物學(xué)實驗。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，無核酶污染，操作簡便，產(chǎn)物純度高，重復(fù)性好。

技術(shù)背景

核糖體（ribosome）是一種細(xì)小顆粒的核糖蛋白復(fù)合物（ribonucleoprotein complex），生命細(xì)胞制造蛋白質(zhì)的非膜性結(jié)構(gòu)元素和轉(zhuǎn)譯裝置（translational apparatus），由RNA和蛋白質(zhì)組成，具有多肽轉(zhuǎn)移酶的活性。其分成2個亞體：大亞體和小亞體。核糖體通過大亞體結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)核糖體（tRNA），而小亞體結(jié)合信使RNA（mRNA），然后閱讀RNA提供的信息，轉(zhuǎn)譯（translation）成氨基酸，連接成蛋白分子。真核生物的核糖體位于胞質(zhì)（游離核糖體）、線粒體和葉綠體中。其中胞漿核糖體為80S核糖體，分子量為4.2MDs，由40S小亞體和60S大亞體組成：60S由5S RNA、28S RNA、5.8S亞基和49個蛋白組成；而40S由18S RNA和33個蛋白組成。線粒體和葉綠體核糖體與原核生物相似，為70S核糖體，分子量為2.7MDs，由30S小亞體和50S大亞體組成：50S包括5S、23S RNA和34個蛋白；30S包括16S RNA和21個蛋白。原核生物的核糖體RNA和蛋白質(zhì)重量之比為2:1，而真核生物為1:1。核糖體在鎂離子和冰醋酸的作用下，RNA和蛋白質(zhì)分子分離，進(jìn)而通過異硫氰酸胍（guanidine isothiocyanate）快速滅活RNA酶。同時在新鮮的β-巰基乙醇（β-Mercapto ethanol）的參與下，阻止RNA酶分子間二硫鍵的重新形成。在酸性環(huán)境下，酚氯仿的結(jié)合，使RNA與殘余蛋白和DNA徹底分離。

產(chǎn)品內(nèi)容

解離液（Reagent A）      毫升

清理液（Reagent B） 毫升

萃取液（Reagent C）      毫升

沉淀液（Reagent D）      毫升

凈化液（Reagent E）      毫升

保存液（Reagent F） 毫升

產(chǎn)品說明書 1份

保存方式

保存萃取液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

4℃微型臺式離心機(jī)：用于樣品操作

渦旋震蕩儀：用于混勻

實驗步驟

1． 準(zhǔn)備好1至5毫克純化核糖體顆粒

2． （選擇步驟）加入xx毫升預(yù)冷的解離液（Reagent A）

3． （選擇步驟）渦旋震蕩15秒

4． （選擇步驟）置于冰槽里孵育30分鐘

5． （選擇步驟）放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g

6． （選擇步驟）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管（注意：可以用于后續(xù)蛋白樣品分析）

7． 加入xx毫升預(yù)冷的清理液（Reagent B），混勻顆粒群

8． 加入xx毫升萃取液（Reagent C）

9． 強(qiáng)力渦旋震蕩30秒

10． 置于冰槽里孵育15分鐘

11． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g

12． 小心移取1毫升上層液相溶液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管，留下（丟棄）25微升相位交界面的溶液

13． 加入xx微升沉淀液（Reagent D），混勻

14． 置于－20℃冰箱里，孵育15分鐘

15． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

16． 小心抽去上清液

17． 加入xx毫升凈化液（Reagent E）

18． 放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

19． 小心抽去上清液

20． 空氣中晾干

21． 加入xx微升保存液（Reagent F）

22． 放進(jìn)－70℃冰箱里儲存?zhèn)溆?/font>

注意事項

1． 本產(chǎn)品為10次操作

2． 整個操作須在4℃狀態(tài)下進(jìn)行

3． 整個操作須帶手套

4． 建議使用濾芯槍頭，并格外小心，防止降解RNA

5． 建議所有的操作用品屬于RNA專用

6． 通常1克核糖體樣品可以提取200至500微克RNA量

7． RNA濃度測定（納克/微升）=OD260 X 1000 X 4 (1:100稀釋)；如果稀釋倍數(shù)1:200，則系數(shù)為8； 稀釋倍數(shù)1:400，則系數(shù)為16

8． 純化的RNA保存在－70℃冰箱里，避免反復(fù)凍融

9． 本公司提供系列核糖體制備產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無核酶成分

3． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高

使用承諾

秉著“信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量承諾”的宗旨為我們的用戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后，應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定，保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題，請立即以書面形式（實驗報告）與本公司聯(lián)系，并將該產(chǎn)品退回，經(jīng)檢驗確系產(chǎn)品質(zhì)量所致，本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯誤操作所致，本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

訂購信息

單組分訂購信息

編號 名稱 規(guī)格

GMS10413 核糖體（ribosome）RNA解離試劑盒 10次

GMS10413A 解離液（Reagent A）      毫升

GMS10413B 清理液（Reagent B） 毫升

GMS10413C 萃取液（Reagent C）      毫升

GMS10413D 沉淀液（Reagent D）      毫升

GMS10413E 清理液（Reagent E）      毫升

GMS10413F 保存液（Reagent F） 毫升

試劑盒訂購信息

 上海極威生物科技有限公司（Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.）成立于上海，公司由專業(yè)人員提供全程咨詢和技術(shù)支持，包括確定測定指標(biāo)、選擇合適的試劑盒規(guī)格、試劑盒保存、預(yù)測定和測定結(jié)果分析等。公司主營產(chǎn)品有elisa試劑盒，小鼠elisa試劑盒，大鼠elisa試劑盒，植物elisa試劑盒，食品安全系列試劑盒，糖尿病系列試劑盒，細(xì)胞因子系列試劑盒，血漿相關(guān)指標(biāo)elisa試劑盒，一步法試劑盒，生化試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞株，生化試劑，技術(shù)服務(wù)（生化測試、液相氣相檢測、ICP-MS測試），使用的檢測試劑盒，讓用戶省心；專業(yè)的檢測服務(wù)，讓用戶省力；優(yōu)惠的價格，讓用戶省錢。極威生物已經(jīng)為廣大用戶提供了生化檢測試劑盒和代測服務(wù)，幫助他們輕松獲得了真實可靠的檢測數(shù)據(jù)，顯著提高了用戶的科研效率，為其發(fā)表高水平的研究論文提供了堅實的平臺；為研究生按時畢業(yè)，導(dǎo)師順利結(jié)題、申請新課題和晉升職稱提供了實實在在的幫助，公司客戶遍布國內(nèi)各大學(xué)、醫(yī)院、研究所、衛(wèi)生防疫、生物公司等單位，得到廣大客戶的一致信賴。