描述：Caspase-9也稱ICE-LAP6或Mch6，可與細(xì)胞色素c和Apaf1形成復(fù)合物被激活，并進(jìn)一步激活細(xì)胞凋亡的最關(guān)鍵酶caspase-3，從而觸發(fā)凋亡級聯(lián)反應(yīng)。Caspase-9是凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中重要的上游caspase，其激活可以通過磷酸化進(jìn)行調(diào)控。測定原理基于Caspase-9特異水解多肽底物L(fēng)EHD-pNA  (Leu-Glu-His-Asp-p-nitroanilide)，釋放的游離硝基苯胺pNA在405 nm有最大吸光度。采用可見光光度比色法測定pNA而得到Caspase活性。適用于檢測哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞Caspase-9活性。

組成 (所示為100次檢測, 50次檢測試劑量減半)

1.   裂解緩沖液20 ml, 4 oC 

2.   反應(yīng)緩沖液10 ml, 4 oC

3.   底物 0.5 ml, -20 oC避光

4.   pNA標(biāo)準(zhǔn)品 0.2 ml, -20 oC避光

       試劑常溫運(yùn)輸，到達(dá)后按要求儲(chǔ)存，1年內(nèi)穩(wěn)定。

所需儀器：可見光分光光度計(jì)配100μl比色杯，或酶標(biāo)儀。最佳波長405 nm，也可測OD400~450 nm但靈敏度略降。