儲(chǔ)存：-20°C避光

有效期：半年

描述： BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng)，形成不溶性的藍(lán)紫色的NBT-formazan 。

適用：

免疫組化實(shí)驗(yàn),包括細(xì)胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色;

Western，Northern, Southern雜交等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測(cè);

細(xì)胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。 

組成：

1x堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 150mL  （2瓶）

BCIP溶液(25X)            5mL

NBT溶液(25X)            5mL

使用說明：

1.        對(duì)于組織切片、細(xì)胞樣品或膜而言，在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3次，每次5-10分鐘。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品，在適當(dāng)固定后，也用適當(dāng)洗滌液洗滌3次，每次5-10分鐘。

2.        40uL NBT溶液(25X)與1ml 1x堿性磷酸酯酶顯色緩沖液混勻，再加入40ul BCIP溶液(25X)混勻，配置成反應(yīng)工作液，最好現(xiàn)用現(xiàn)配。

3.        把經(jīng)過洗滌后的NC膜或PVDF膜或其他樣本浸入反應(yīng)工作液，在確保能夠充分覆蓋樣本。

4.        室溫平緩搖動(dòng)孵育，細(xì)心觀察反應(yīng)過程，當(dāng)?shù)鞍讞l帶的顏色深度達(dá)到要求（一般約20-30 分鐘）時(shí)，把膜浸入蒸餾水中停止反應(yīng)（注意：若信號(hào)太弱可增加反應(yīng)時(shí)間）。

注意事項(xiàng)：

1.          BCIP對(duì)人體有刺激性，NBT對(duì)人體有害，請(qǐng)戴手套操作，注意防護(hù)。

2.          可根據(jù)樣本的量按照比例適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)工作液體積。

3.          顯色須在嚴(yán)密觀察下進(jìn)行；時(shí)間可根據(jù)顯色情況調(diào)整，過長(zhǎng)則造成顯色過度，出現(xiàn)非特異染色，干擾結(jié)果判斷或出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

4.          顯色過深的常見原因： 封閉不佳；抗體濃度過高；洗滌不充分；顯色時(shí)間過長(zhǎng)。

5.          顯色過淺的常見原因：目的蛋白含量過少；抗體種類不合適或抗體濃度過低；顯色時(shí)間不夠；

6.          本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床治療、食品等用途。

相關(guān)產(chǎn)品:

1.          Western Blot SuperECL超敏發(fā)光液；

2.          中、寬范圍藍(lán)色蛋白預(yù)染分子量Marker；

3.          Western Blot膜再生液、Western Blot膜高效封閉劑 、Western Blot膜10秒鐘高靈敏染色液；

4.          胞核和胞漿蛋白提取試劑盒、膜/疏水蛋白與親水蛋白雙相分離系統(tǒng)、線粒體制備試劑盒、細(xì)胞核制備試劑盒。