

武漢思特進科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
亞細胞定位方法-思特進-植物亞細胞定位培養(yǎng)
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
通過比較不同侵染液濃度、侵染時間、取材部位、預處理等條件下的轉(zhuǎn)化效果,優(yōu)化了農(nóng)介導的洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞轉(zhuǎn)化系統(tǒng),并且成功檢測到大蕉ASR蛋白(MpASR)與GFP的融合蛋白在洋蔥表皮細胞中的分布。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
目的構建通用型植物GFP標簽蛋白表達載體,研究蛋白質(zhì)的細胞內(nèi)定位對蛋白質(zhì)組學和代謝組學等研究的意義。方法構建2種GFP標簽蛋白質(zhì)表達載體,分別在GFP的N和C端預留位點,以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結構域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細胞核定位信號。利用農(nóng)介導植物瞬時表達侵染本氏和洋蔥表皮細胞,觀察GFP熒光表達情況。結果成功構建了2種融合了目的基因和GFP的表達載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細胞,可在細胞核和細胞質(zhì)中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細胞,只在細胞核中觀察到綠色熒光。結論該載體系統(tǒng)可運用于研究蛋白質(zhì)在植物細胞中的亞細胞定位,具有簡單、和通用性的特點。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
以苧麻優(yōu)良品系'5041-3'子葉作為受體,利用根癌農(nóng)介導法進行了綠色熒光蛋白基因的遺傳轉(zhuǎn)化研究,農(nóng)菌株為EHA105,重組質(zhì)粒為pBINm-GFP5-ER。經(jīng)農(nóng)浸染后的子葉外植體經(jīng)過共培養(yǎng)、選擇培養(yǎng)、伸長培養(yǎng)和生根培養(yǎng)后再生出抗性植株,對抗性植株的再生過程進行了GFP熒光檢測,結果表明,GFP基因能在苧麻中強烈表達,證明GFP基因能夠在苧麻遺傳轉(zhuǎn)化中得到應用。對抗性植株的Southern雜交檢測證實外源基因已整合到苧麻基因組中。
